扣一扣国标中瘦肉精检测方法中的酶解问题

应助达人

我们单位购买的这种酶剂价格很贵的啊

这么贵的酶，不能稀里糊涂地用啊。

应助达人

第一点：找度娘了解了一下，unit就是单位的意思，那么也可以理解为就是U。
第二点：抛开这两个标准，我们再来看看SN/T1924-2007《进出口动物源性食品中克伦特罗，莱克多巴胺，沙丁胺醇，特布他林残留量的检测－液相色谱－质谱法》的描述：β-盐酸葡萄糖醛甙酶-芳基硫酸酯酶：含β-盐酸葡萄糖醛甙酶134600U/mL，芳基硫酸酯酶5200U/mL。如果合并计算的话含量则为139800U/mL，即1139.8U/uL。该标准在提取过程中说明10g样品用量为50uL，即酶用量为6990U。
现在回过头来看上述两个标准：
GB/T 22286-2008 《动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定 液相色谱串联质谱法》规定2g样品用酶500U，折算成10g样品需要酶2500U。
GB/T 21313-2007《动物源性食品中β-受体激动剂残留检测方法 液相色谱-质谱/质谱法》规定10g样品用酶100uL，假设酶的含量为30U/uL（注意：这是的单位是U/uL，即认为制订标准的同志出现笔误了！），那么酶的用量就是3000U。这个水平与SN/T1924-2007、GB/T22286-2008比较接近！
综上所述，可以得出以下几个结论：
1.GB/T21313-2007在酶的规格上出现重大失误，应该是30U/uL，即30000U/mL。
2.在莱克多巴胺的酶解方面，酶的用量为每10g样品加酶2500-7000U左右。
查了一些色谱试剂供应商的资料，每100KU价格在800元左右，折算到每个样品约20-60元，确实不算便宜。可能的话，建议适当降低酶用量，毕竟目前样品中莱克多巴胺基本是没有的。如果检出莱克多巴胺含量较高的话，建议提高酶用量再检一次。

附：在查阅资料的时候发现，农业部数个公告虽然规定了酶的用量，但却未明确酶的规格（含量），这样的标准让标准的使用者情何以堪！

有可能撰写标准的单位做试验时所用到的酶的购买的厂商不同，不同的酶的生产厂商所标定的酶活的形式也是有可能不同的。我们用酶来释放细胞内待测物，达到效果即可。楼主的探究精神值得钦佩！

应助达人

这种酶就是很贵的

应助达人

[div]原文由xndxlzm发表：

这种酶就是很贵的[/div]可以不用吗？

应助达人

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这种酶就是很贵的[/div]可以不用吗？

应助达人

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这种酶就是很贵的[/div]可以不用吗？

应助达人

记得在另外一篇贴子里看到过类似的问题。
1.GB/T21313-2007在酶的规格上出现重大失误，应该是30U/uL，即30000U/mL（见3楼内容）。
2.能否用21313的酶解量来进行22286的实验呢？回答是不行！如果你一定要按照21313的方法来进行酶解，那么就是对22286的偏离。
3.问题的本质，制订标准的专家要么是笔误，即把ml写成了mg，这也说得过去，因为按照其它标准，1g样品基本上需要酶250-750U。要么专家只考虑到酶的纯度即10000U/mg和酶的使用量50ul，但却忘记告诉我们酶的浓度，也就是每ml酶溶液含多少单位的酶！对于这个问题，楼主不必过于纠结，按照我的理解，楼主在做实验的时候，只要在作业指导书中予以明确就可以了，比如每g样品加酶250U。