花生中黄曲霉毒素的检测
黄曲霉毒素是由黄曲霉、寄生曲霉产生的一类高毒性代谢物，它们生长在土壤中并通过直接接触转移到天然产品中。自黄曲霉毒素被认定为是一种强致癌物质起，欧盟就规定了最大限量。本文采用高效液相色谱法测定花生中的黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2，采用了柱后衍生法测定，灵敏度高，结果理想。
检测依据：GB/T18979-2003 ；液相色谱仪：LC-10AVP
色谱条件：色谱柱：
色谱柱：Welchrom-C18 ( 250 mm ×4.6 mm 5μ ); Serial Number：W13212257；
流动相：水：甲醇=55：45；流速：1mL/min。荧光检测器：激发光波长：360nm 发射光波长：450nm 增益：17；柱温：30℃；衍生方式：柱后光化学衍生（254nm）
进样量：10uL
混合对照品溶液的配置： 精密量取黄曲霉毒素混合标准品溶液0.5ml于10ml容量瓶中，用甲醇定容，为储备液，精密量取该储备液适量，分别制成不同浓度的混标溶液；
供试品溶液的配置：称取粉碎花生试样约15g ，加人氯化钠3g ，置于均质瓶中，用70%甲醇溶液定容至125ml，高速搅拌2分钟（搅拌速度大于11 000转/分钟），离心5 分钟（ 离心速度2500 转/ 分钟） ， 精密量取上清液15ml，用水定容至50mL，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，量取此滤液10.0ml,通过免疫亲合柱（Welchrom®Aflatoxin G1 G2 B1 B2 货号：01140-00031 ），流速每分钟3ml，用水20ml洗脱，洗脱液弃去，使空气进入柱子，将水挤出柱子，再用适量甲醇洗脱，收集洗脱液，置2ml容量瓶中，甲醇定容，过滤后进液相色谱分析。
定容体积为：125mL； 稀释用样品滤液体积：15mL；定容至50mL；过免疫亲合柱滤液体积：10mL，甲醇洗脱液体积；2mL。
工作曲线系列B1、B2、G1、G2混标使用液浓度：0、2、4、8。5、10、21ng/mL。
2ng/mL混标分离色谱图：
20ng/mL混标液分离色谱图：
G2、G1、B1、B2工作曲线线性：
花生样品的检测色谱图：
平行试验：
表1 加标回收率测定结果
样品名称 |
原始含量(ng/g) |
加标含量(ng/g) |
检测量(ng/g) |
回收率(%) |
黄曲霉毒素G2 |
/ |
20 |
18.48 |
92.4 |
黄曲霉毒素G1 |
/ |
20 |
18.72 |
93.6 |
黄曲霉毒素B1 |
4.3 |
20 |
23.58 |
96.4 |
黄曲霉毒素B2 |
1.43 |
20 |
19.67 |
91.2 |
结论：综合以上的分析结果可知，该花生样品G2、G1未检出，检出B2的量为：（0。252+0。258）/2*2/（15/125*15/50*10）=1。43ug/kg;检出B1的量为：（0。796+0。746）/2*2/（15/125*15/50*10）=4。3ug/kg,合格，可以放心食用。
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