气相色谱-串联质谱法检测黑枸杞和蓝莓中多农药残留量
【生活中的仪器分析】
摘要：通过气相色谱—串联质谱（GC-MS/MS）的分析方法，检测市售黑枸杞、蓝莓样品中多种农药残留量，采用乙腈提取、固相萃取(SPE)柱净化，所有农药在色谱仪器上20分钟内完全分离并流出，该方法快速、简便，灵敏度、精密度和准确度均满足多农药残留分析要求，
关键词：蓝莓；黑枸杞；农药残留；气相色谱—串联质谱；固相萃取
蓝莓物种名称：越桔。英文名称：Blueberry。属杜鹃花科，越橘属植物。起源于北美，多年生灌木小浆果果树。因果实呈蓝色，故称为蓝莓。蓝莓果实中含有丰富的营养成分，具有防止脑神经老化、强心、抗癌、软化血管、增强人机体免疫等功能。主要生长在北纬38°地区，如内蒙加格达奇。其中，由于蓝莓富含花青素，具有活化视网膜功效，可以强化视力，防止眼球疲劳而备受注目。也是世界粮农组织推荐的五大健康水果之一。也是射击运动员必备的食品。（摘自百度百科，属常识普及）
黑果枸杞（学名：Lycium ruthenicum Murr）蒙名为“乔诺英-哈尔马格”、藏药名“旁玛”，属于茄科枸杞属。为多棘刺灌木，多分枝，枝条坚硬，常呈之字形弯曲，白色。分布于中国西北、西北几省及西藏和欧洲中亚。黑果枸杞味甘、性平，富含蛋白质、枸杞多糖、氨基酸、维生素、矿物质、微量元素等多种营养成分。还含有丰富的黑果色素—天然原花青素（红果枸杞不含），其OPC含量超过蓝莓（黑果枸杞含OPC3690mg/100g；蓝莓含OPC330～3380mg/100g），是迄今为止，发现OPC含量最高的天然野生植物。原花青素OPC是最有效的天然水溶性自由基清除剂，其功效是Vc的20倍、VE的50倍。黑枸杞被誉为野生的“蓝色妖姬”;黑果枸杞会比一般红色枸杞更珍贵更有药用价值。（摘自百度百科，属常识普及）
气相色谱在分离多农药组分残留中应用广泛，质谱作为检测器可提高农药定性的准确性，串联质谱是目前农药残留检测中最为先进的技术，二级质谱相对于一级质谱，其抗干扰能力更强，可有效消除单级质谱的离子信息少的问题，对样品前处理的要求更低，可以真实反映样品的实际农药残留情况。
本次试验对象为两种色素较为深的样品（黑枸杞和蓝莓），通过SPE净化前、后进样对比固相萃取柱的效果。
1 实验部分
1.1 仪器、试剂与材料
气相色谱—串联质谱仪（Agilent 安捷伦，7890B-7000B）；气相色谱仪（Agilent 安捷伦，7890A）；分析天平（Mettle-Toledo 梅特勒-托利多）；旋转蒸发仪（EYELA埃朗）；高速离心机（CT18RT 天美）。
正己烷、乙腈（Fisher Scientific 飞世尔）；氯化钠、甲苯、丙酮（色谱纯，天津光复精细化工研究所）；石墨化炭黑—氨基柱（Agilent 500mg/6mL安捷伦公司----Welchrom 500mg/6mL Welch Materials, Inc.）。
农药标准品：六六六、五氯硝基苯、百菌清、乙烯菌核利、三唑酮、三氯杀螨醇、腐霉利、滴滴涕、异菌脲、联苯菊酯、甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、氯菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氟氰戊菊酯、氰戊菊酯、氟胺氰菊酯、溴氰菊酯、甲胺磷、敌敌畏、乙酰甲胺磷、氧化乐果、甲拌磷、乐果、甲基对硫磷、二嗪磷、甲基异柳磷、倍硫磷、杀扑磷、杀螟硫磷、马拉硫磷、对硫磷、毒死蜱、水胺硫磷、丙溴磷、三唑磷、亚胺硫磷、伏杀硫磷。
农药标准品：1000 mg/L，农业部环境质量监督检验测试中心提供。
试验材料：市售黑枸杞、蓝莓果。
1.2实验方法
1.2.1 样品处理及提取
将样品进行匀浆粉碎处理，准确称取5克样品，加入20 mL乙腈，1.0g NaCl组织捣碎机均质2min，10000r/min离心1min后，取上层有机相10mL放入浓缩瓶中。
1.2.2 固相萃取净化
将吸取的10 mL有机相减压旋转蒸发后，用5mL乙腈-甲苯（v/v=3:1）的淋洗液溶解，全部倒入石墨化炭黑—氨基柱，进行净化处理，自然流下后，用10 mL淋洗液清洗浓缩瓶残留物后继续倒入净化柱内，收集全部洗脱液约15 mL左右于浓缩瓶中，减压旋转蒸发近干后，用正己烷定容至2.5mL进样。
1.3仪器条件
气相色谱串联质谱条件：色谱柱：HP-5MS（30 m×0.25 mm×0.5 μm）；载气：氦气（99.999%）；恒流模式流速：1.0 mL/min；进样：1.0 μL，不分流；进样口温度：250 ℃；程序升温：80℃保持1min，以20 ℃/min升温至280 ℃，保持10 min；离子化方式：电子轰击（EI）；离子化能量：70 eV；离子源温度：230 ℃；传输线温度270 ℃；Q2碰撞气：氮气；溶剂延迟：3 min；扫描方式：多反应监测（MRM）。扫描范围：50～450 amu；定量方式：外标法。
气相色谱条件：进样口：温度250℃，不分流进样；检测器：ECD（电子捕获检测器），基座温度250℃，检测器温度300℃；石英毛细管柱：HP-5（30m×0.25mm×0.25μm）柱，30m×0.25mm×0.25μm；柱温：100 ℃保持1min,以20℃/min升至280℃，保持10min；载气流量：N2：1.0mL/min。
2 结果与讨论
2.1 方法的选择和建立
在多农残检测试验中，串联质谱采用多反应监测模式（MRM）比单级质谱的选择离子监测模式（SIM）抗基质干扰能力大大提高，可有效提高农药检测的灵敏度和准确性，建立串联质谱的参数条件以及按照3倍信噪比作检出限（见表1）。
图1 45种农药GC-MS/MS色谱图（0.2mg/L）
表1农药的串联质谱检测条件及方法学参数
2.3方法回收率、精密度及检出限
对蓝莓与黑枸杞样品各添加0.2和0.05mg/kg两种不同浓度的混合标准，按试验步骤操作，其中对0.2mg/kg浓度添加3个平行样品，对浓度0.05mg/kg的添加5个样品进行回收率重复测定。通过计算所得的加标回收率、相对标准偏差(RSD)见表1。本次试验所选择的样品空白测定均未检出农药残留。
3 结论
从净化的色谱图（ECD）对比可以看出，不同两个品牌的柱子净化效果是一样的（填料相同的情况下）；但不同品牌填料的颗粒度（填充工艺）对自然淋洗的速度影响较大，但如果有外力（挤压或固相萃取装置）的帮助下该项指标可忽略。
附 不同品牌SPE柱淋洗时间对比
试验各步骤耗时统计
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