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为什么普通C18色谱柱不能用纯水冲洗?

三人行

2014/07/28

为什么普通C18色谱柱不能用纯水冲洗?

我们常常会被问到这样一些问题：“我的样品是水溶性的，流动相中含有缓冲盐和甲醇，我不能用水来冲洗所有水溶性的污染物吗？”回答是：“不可以”。用水冲洗C8或者C18色谱柱有两个缺点，第一，这些色谱柱一般不能与100%水匹配。第二，样品一般总是溶于乙腈和甲醇。
用一个不是很恰当的比喻，C18的填料看起来像许多网球，C18链则像一些绒毛附在填料的表面。这些填料像一些所有表面都在颗粒内部的一块含有6-15nm直径小孔的海绵。C18链的表面与固定相键合在小孔的里面，一小部分裸露在固定小填料的表面，所以这些小孔是非常疏水的。在正常的操作中，水-有机溶剂流动相进入小孔中且完全润湿固定相。分析物的分子分布于细孔的内外，并通过与固定相的相互作用被保留在色谱柱上。当流动相被水替代后，水分散到小孔中，那么有机相被水稀释了，可是水的极性太大了，以至于不能渗透到键合相，不能很好地起到冲洗固定相的作用。当所有的有机相从小孔中被赶走以后，相对于键合固定相，流动相（100%水）极性太大了，它会被推出小孔外，这些在非极性颗粒表面凝结的小水滴就像在停车场里一个油点上的水珠。这种现象发生的时候，即使你用一天的时间冲洗，色谱柱也不会得到清洁。同时，当有机相重新加入时候，则需要更长的柱平衡时间。
这种从色谱柱填料细孔中将水排斥出去的过程为“去湿化”。过去我们称之为“固定相”塌陷，其实固定相没有真的塌陷，只是它把水从固定相颗粒的细孔中排出在外。有些色谱柱可以被100%水冲洗，而不会被“去湿化”。这些色谱柱中嵌入了极性固定相，有时称之为“AQ”柱或与水匹配的色谱柱，由于色谱柱中含有足够的极性固定相，可以使用100%水。

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dahua1981

第1楼2014/07/28

应助达人

楼主真是个有心人啊

0

三人行

第2楼2014/07/28

多谢夸奖，了解一下比较好。
dahua1981(dahua1981) 发表:楼主真是个有心人啊

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御风飘逝

第3楼2014/07/29

也就是，以前的所谓的不可逆的填料塌陷，其实是可以再生回来的？

0

吕梁山

第4楼2014/07/29

C18是疏水的

0

吕梁山

第5楼2014/07/29

楼主解释的很形象，不错，赞一个

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ECHO007

第6楼2014/07/29

解释的详细，便于理解。

0

三人行

第7楼2014/07/29

再生有一定难度，效果不一定很好。
御风飘逝(yuanrui82) 发表:也就是，以前的所谓的不可逆的填料塌陷，其实是可以再生回来的？

0

三人行

第8楼2014/07/29

一般的C18都是疏水色谱柱,分析极性强的样品,都会保留比较弱。
吕梁山(shih20j07) 发表:C18是疏水的

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御风飘逝

第9楼2014/07/29

[div]原文由jncxyy2012发表：

再生有一定难度，效果不一定很好。[/div]帖子里说的不是这个意思吗？

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yyx_001

第10楼2014/11/24

C18没有用C18有机嵌入的话是疏水的，也就是说非极性C18链的话就是不能用纯水？跟非极性键合的话就是疏水的？

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