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【色谱技巧】毛细管电泳法操作经验分享

nini2006

2015/05/29

毛细管电泳（CE）

这是我多多师父发起的一个5月份的活动，说过要支持的，要说到做到。月末了，今天搜肠刮肚，把几年来做CE的经验跟大家分享一下，不多，但希望对大家有用。
1 断流的可能原因
a、有气泡。解决办法：所有进入毛细管的液体都要超声排气，特别是容易起气泡的溶液，如SDS。
b、有沉淀物。解决办法：所有进入毛细管的液体都要过滤，滤膜孔径要比毛细管内径小。
c、毛细管有裂口，最容易裂的地方是窗口处和毛细管出口端，有时候看不出来，因为加压注水的时候仍能看到液滴出来，需要用手碰一碰才能发现。
2 基线漂移
a、毛细管没活化好：需要用0.1 M氢氧化钠多冲一冲
b、毛细管没平衡好：冲完氢氧化钠和水后需要用buffer再冲一段时间，这个时间得根据buffer的组成而定。必要时候需要跑空白一段时间。
c、灯接近寿命：查看灯的使用时间，如果已经两千多个小时接近三千小时的话，可以考虑换灯了。
d、毛细管寿命已到。毛细管是有使用寿命的，这个寿命长短说不好，得看你怎么保养，当然，还跟使用的buffer有关。有些buffer特别伤管子的。
3 常见缓冲溶液的使用
缓冲溶液一般是先配好stock solution，使用的时候再进行稀释。但是stock solution也不能长时间存放，0.1 M 的磷酸、硼砂等溶液常温下一个星期就会有变化，再长时间可以看到有沉淀析出。但是也不能因此放到冰箱去，因为放到冰箱也会有沉淀析出，最好常温存放，然后每星期重配一次。另外，配置硼砂的时候要稍微加热帮助溶解，不然溶解不了。但加热也不要太猛烈，不然溶解效果也是不好。
4 sds使用注意事项
sds在配置过程中容易产生气泡，所以如果用容量瓶来配置是不实际的。这时候就不能对sds的浓度做精确要求。所以，一般用量筒或者离心管配置就好了，加水的时候用玻棒引流，小心的搅拌，边配置边超声促进溶解。
5 毛细管的使用和维护
避免用强碱溶液长时间冲洗，比如1 M氢氧化钠，内壁会被腐蚀的。长时间不用的时候应该吹干，两端密封保存。也有人建议用水封存。
6 UV灯的使用注意事项
不要暴力关电，要在操作界面按关灯键。一般不超过两小时暂停检测不需要关灯，因为开关灯都是会对灯造成损害的。

分
该帖子已被版主-老多_小多加20积分，加2经验;加分理由:活动奖励

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CEcret

第1楼2015/05/30

很有用的总结，谢谢分享

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老多_小多

第2楼2015/06/02

看的出来是百忙中写的经验，不错，辛苦
不错的分享，都可以让大家好好学习

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nini2006

第4楼2015/06/02

必须哒，铁杆粉丝嘛~
老多_小多(emoc98311) 发表:看的出来是百忙中写的经验，不错，辛苦
不错的分享，都可以让大家好好学习

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山大的邻居

第5楼2015/06/04

学习了

0

wy20071722

第6楼2015/06/04

真是实用的，都是平时亲自操作的分享啊！

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nini2006

第7楼2015/06/04

是的哟
wy20071722(wy20071722) 发表:真是实用的，都是平时亲自操作的分享啊！

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hjbfrasm

第8楼2015/06/29

很有用，谢谢

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ericwong

第9楼2015/06/30

很多时候第一手的经验是最珍贵的。
就像现在并不缺乏大学生，缺少的是各个工种的八级工。

0

隆美尔

第10楼2016/02/26

好文章,很有用，谢谢

0

chinarenm

第11楼2016/03/12

不错，谢谢分享，希望以后多发表检验经验！

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