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gpc标曲一直做不好,求指导

  • tiantangya
    2015/06/12
  • 私聊

凝胶色谱(GPC)

  • 实验室用的岛津gpc,rid-10a的检测器,今年新买了根柱子,第一次用先做标曲,用的是聚苯乙烯,4个分子量:1300, 2200 ,5200, 13000.做完样后按照仪器的操作说明做了标曲,普适校正,k值是0.00016,&是0.706。然后做了标曲,算出来的分子量很怪,是不是和我检测时的温度有关,检测时温度是35度,但是我没找到相关的k值,就用了25度时的参数。还有gpc柱子的使用说明说柱子要和检测器温度相同,但是检测器开的时间长了温度会上升,怎么设置?怪了我上不了图片,先附上pdf。望各位不吝赐教。

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  • 小不董

    第1楼2015/06/13

    应助达人


    帮你把图直接附上来了, 拟合的曲线不对,你用一根柱子,若是均匀的粒径,孔径的,用一次函数拟合就可以,你搞成三次函数了。
    另你这是什么柱子?分离的分子量那么小,混标是你买的还是现成的产品?一般现成的四种混标分子量不会相差那么小,你能把谱图传上来吗?
    那你样品的分子量大概或理论为多少呢?出峰时间在什么位置?是否这个柱子和流动相能满足你的要求?

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  • tiantangya

    第2楼2015/06/15

    感谢版主指教。我是用的三次方程拟合的,但是以前做的时候可能也是用的三次拟合,不过我也不确定,之前不是我做的标曲。柱子用的是东曹的g3000hxl。标样是聚苯乙烯,1300,2200, 5200, 13000 ,不知你说的混标什么意思,我们是一瓶一瓶的。样品分布是从几百到一万多。柱子是跟以前用的那根是一个型号的,满足要求是可以的。现附上标线谱图,请您再指点。我还是上传不了图片,不知是不是浏览器问题。麻烦版主再传一下。

    小不董(doxw0323) 发表:
    帮你把图直接附上来了, 拟合的曲线不对,你用一根柱子,若是均匀的粒径,孔径的,用一次函数拟合就可以,你搞成三次函数了。
    另你这是什么柱子?分离的分子量那么小,混标是你买的还是现成的产品?一般现成的四种混标分子量不会相差那么小,你能把谱图传上来吗?
    那你样品的分子量大概或理论为多少呢?出峰时间在什么位置?是否这个柱子和流动相能满足你的要求?

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  • 小不董

    第3楼2015/06/16

    应助达人

    图片是有要求格式,一般的jpg都可以,tif格式可能不可以。 在高级回复里,上传后,插入图片就可以。

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  • 小不董

    第4楼2015/06/16

    应助达人

    看过你的谱图,是单标,一个样品就一个标准物质,谱图很漂亮,都没问题, 就是你选择曲线不对。选择一次函数你和就好了。

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  • tiantangya

    第5楼2015/06/16

    感谢版主指教,

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  • m3019883

    第6楼2015/06/22

    样品的k、阿尔法要知道才能正确计算哦。你这个结果的三次方拟合在校正范围内应该比直线要好,你可以看一看误差数据。

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  • m3019883

    第7楼2015/06/22

    RI检测器和柱温箱应该能恒温哦!你检查清楚吧

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  • polylactic

    第8楼2015/06/24

    一般科研才用三次函数,你做的单标谱图很好,用一次方程就够了,不同温度的k值区别很大,a则不大,要重新查找35度时的k值。检测器应该控温准确的,特别是示差检测器更要如此,先把外界温度稳定了,空调开开

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  • m3019883

    第9楼2015/06/25

    不是科研才三次,凝胶柱并不严格呈直线,多次多项式拟合效果更好,标样点越多,高次拟合效果越好,通过误差分析就知道了。可以用到五次,再高意义也不大了。

    polylactic发表: 一般科研才用三次函数,你做的单标谱图很好,用一次方程就够了,不同温度的k值区别很大,a则不大,要重新查找35度时的k值。检测器应该控温准确的,特别是示差检测器更要如此,先把外界温度稳定了,空调开开

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  • 暖暖ZZ

    第10楼2015/07/04

    且不说计算的分子量问题,看拟合曲线有点奇怪。
    标准品分子量范围要覆盖你的样品分子量。
    我们也用三次函数,但我们用7个点

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