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色谱县令巧比暗喻色谱分离

  • 一片枫叶
    2015/07/13
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 应邀参加体育赛,色谱县令乐开怀,随同前往有三君,A君B君和C君,A君长着极性相,常与碱性有来往,B君温柔又善良,不左不右好心肠,C君外貌并不洋,私下与酸谈对象。
    色谱县令坐上轿,前面三君来开道,一路正在往前赶,遇到情况不一般,绿女红男路两边,硅胶基质路上现,不酸不碱没有盐,貌似甲醇与水在中间。
    A君显得很怠慢,一见绿女不想前,拉在后面嘴真甜,还想留影做留念。
    B君什么都不见,一心一意保安全。
    C君跑在最前边,摇摇欲试跑得欢,虽然没有强保留,但有尾巴在后头。
    色谱县令连忙喊,A君为何走得慢,C君等等本县官……
    这时县令心里着急,却陡然想起色谱柱分离——这现象虽然与色谱无关,但貌似与色谱分离有缘!

    中性,酸性化合物在中性条件下,具有较好的保留,碱性化合物容易受硅醇活性的影响引起拖尾。
    有些碱性化合物,在具有显著硅醇活性固定相的色谱柱上大部分都会发生拖尾现象,而且在中性pH68)比在酸性pH<3)条件下更易发生。
    中性,和酸性化合物一般不受影响,一些碱性化合物更易受到此效应的影响。



    说时迟那时快,色谱县令登上检阅台,三君进行热身赛,全力争夺金银牌。

    首先进行游泳赛,先把规则晒一晒,游泳赛道有规定:第一赛道显酸性,第二赛道呈碱性,硅胶基质键合相,羟基藏在泳道旁;中间流体甲醇水,体积比例正相当;池中温度正适宜,极性相比较大滴;三人一道同时比,名次分出三二一。
    第一赛道已上场,三君优势不一样,各有诀窍心中藏,面对泳道有幻想,浑身聚集正能量,只等发令往前闯!
    呯……一声发令枪响,哗……三君冲入赛塘,这可是要命的比量……
    色谱县令看得清亮,C君很快沉入池塘,若隐若现像捉迷藏;B君悠然自得往前闯,环境基本没有影响;A君却是一如既往,发挥相对比较正常,色谱县官连连赞赏,鼓励A君继续发扬。本次比赛排名A——B——C。
    此时,县令心中窃喜,这不正是色谱分离?
    中性,和酸性化合物在酸性的条件下,具有较好的保留,有的会发生拖尾。
    某些碱性化合物在酸性的条件下,发生拖尾现象,甚至没有保留,提前出柱。
    酸类化合物在酸性条件下,有时会引起峰的展宽和拖尾,主要由于硅胶固定相的吸附——纠正由此类原因引起的拖尾,就应提高流动相中缓冲盐的浓度来抑制二次反应,降低流动相的pH使硅醇和溶质质子化,必要时可以向流动相中加入竞争性的酸,改善峰型,达到更好的分离效果。



    第二赛道接着上场,三君表现又会怎样,不要着急请看比赛现场!

    发令枪一声鸣响,三君一起冲进泳塘,这次比赛不太一样:A君立马将身隐藏,不知不觉早出池塘;B君竭尽全力往前闯,整个赛程痛断心肠;C君表现比较顽强,小小差错比较正常,总体发挥值得赞赏,赢得冠军美名远扬;本次比赛排名C——B——A。
    色谱县令看傻了眼,A君让他产生失望感,总体来说还不错,不过都有拖尾巴。三人一道超限量,争抢第一太慌忙。条件不适调配方,因人而异不勉强。


    三君泳赛已完毕,问题暴露很彻底。不言而喻不多言,色谱分离在里面。


    碱性化合物在碱性的条件下,具有较好的保留,但中性化合物和碱性化合物在碱性条件下,有时会出现拖尾——解决的办法提高流动相的PH值,抑制碱性化合物的电离,使其为分子状态。
    固定相表面的酸性硅醇基可以形成与碱性化合物反应的离子交换位点,经反相HPLC分离某些化合物时,这种离子交换反应常常引起峰的保留(二次保留)和峰拖尾。
    对于一个碱性化合物,在无盐流动相下保留时间过长,那么可以采用控制流动相为低pH条件,使其达到完全解离,增加其极性,达到缩短分离时间的目的。如果分离的化合物pKa比较低(酸性化合物),在无盐流动相下保留时间比较长,可以采用控制流动相为高一些的pH条件,道理相同。对于保留时间过短的采用相反的调整方式即可,
    当进样量超过柱子的容量,样品峰会呈现一个直角三角形。当更多的样品量注入时,峰的前端变得很尖而后端就拖尾更严重。 另一个现象就是色谱柱过载后保留时间会随样品量的增加而提前。


    游泳比赛已结束,稍作休整进入下一步,后面的赛事更残酷,三君便要下功夫,比赛要有好基础,切记不要出事故。
    色谱县令看得明,每个赛点都很清,有话想对三君言,他们已在赛道前。无奈回到观赏台,也许赛事更精彩!
    下面进行跨栏赛,三君状态有好坏。A君身高体重大,矮子一见吓趴下,虽然优势比较大,赛道并不适合他。B君小巧又玲珑,伶俐机动好名声,自信赛出高水平,努力争创第一名。C君B君像孪生,只是不如B聪明,总结经验记心中,赛出风格显威名。
    三君耳闻令枪响,如龙似虎奔前方,A君好像被栏挡,一脚摔在赛道旁,B君C君受影响,三人跌在栏板上,A君倒下起不来,大赛提前被淘汰,B君机灵觉醒快,恢复状态把路带,C君随后跟其上,仅排第二把名扬。
    色谱县令观其景,评价三君各不同,A君确实不适应,摔倒也在料想中,身高体大便臃肿,堵了赛道没功名,B君C君都拖尾,埋怨A君伤感情。


    这个道理很显明,分离原理在其中:

    对于不适应色谱柱检测的化合物,污染色谱柱的可能性很大,被污染的色谱柱,影响正常检测,使被测组分出现拖尾现象,甚至不出峰。
    这场大赛进行中,色谱县令主意生,一声令下招三君,总结失败啥原因……


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  • langyabeilei

    第1楼2015/07/13

    应助达人

    大赞,生动形象,构思巧妙,可以写一份教案传道授业解惑,以飨学生,肯定会大受欢迎的,谢谢分享。

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  • 一片枫叶

    第2楼2015/07/13

    应助达人

    谢谢!有什么不妥的地方请指正,以便于修改,更加完善。

    langyabeilei(langyabeilei) 发表:大赞,生动形象,构思巧妙,可以写一份教案传道授业解惑,以飨学生,肯定会大受欢迎的,谢谢分享。

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  • 老多_小多

    第3楼2015/07/13

    是不是跟泳池里的水也有关系?呵呵

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  • 一片枫叶

    第4楼2015/07/13

    应助达人

    是的呀,泳池里的水是有规定的。

    老多_小多(emoc98311) 发表:是不是跟泳池里的水也有关系?呵呵

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  • lvdongming

    第5楼2015/07/13

    应助达人

    现在进行游泳赛,池水改成甲醇液,A君略胖浮力大,三下二下冲在前,B君廋小筋骨重,三摇二摆走中间,C君可叹不耐醇,三呼二喊救命啊,一下晕在赛道边。

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  • wunian

    第6楼2015/07/13

    写的太棒了,生动而形象,把枯燥难懂的色谱知识,这样巧妙转化,让人耳目一新,108个赞

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  • 一片枫叶

    第7楼2015/07/13

    应助达人

    感谢指点,将根据您的提醒做进一步修正。

    lvdongming(lvdongming) 发表:现在进行游泳赛,池水改成甲醇液,A君略胖浮力大,三下二下冲在前,B君廋小筋骨重,三摇二摆走中间,C君可叹不耐醇,三呼二喊救命啊,一下晕在赛道边。

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  • 一片枫叶

    第8楼2015/07/13

    应助达人

    感谢支持!

    wunian(wunian) 发表:写的太棒了,生动而形象,把枯燥难懂的色谱知识,这样巧妙转化,让人耳目一新,108个赞

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  • longqiqi66

    第9楼2015/07/13

    楼主 好文采!很专业!

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