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听说六氟异丙醇(HFIP)毒性很大,大家做GPC时有什么好的防范措施吗

凝胶色谱(GPC)

  • 准备用六氟异丙醇(HFIP)做溶剂,听说毒性很大,大家做的时候有什么注意事项或者防范措施?
    另外如何从THF流动相切换到HFIP流动相?

    谢谢!
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  • 老多_小多

    第1楼2015/07/15

    不管毒性大不大,都要做好通风

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  • lu_sunshine

    第2楼2015/07/15

    应助工程师

    防护手套 眼镜 外套 和 猪头~~~~

    可以直接换相的,但是要注意低流速哦。。。
    如果有DMF可以做下过渡。。。

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  • zhywku66

    第3楼2015/07/16

    请问如何用DMF过渡。我现在流动相是六氟异丙醇,柱子是THF的。能给个详细的说明吗?
    第一次做,而且柱子是新柱子,不想让柱子这么快就不行了。
    谢谢!

    lu_sunshine(lu_sunshine) 发表:防护手套 眼镜 外套 和 猪头~~~~

    可以直接换相的,但是要注意低流速哦。。。
    如果有DMF可以做下过渡。。。

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  • 小不董

    第4楼2015/07/17

    应助达人

    你能找到你的柱子的说明书吗?有流动相切换的操作说明的。
    一般过渡都是用过渡的溶液用0.1-0.2ml/min的流速,冲洗2-3倍柱体积,怎么计算呢,就是你在分析样品时容积峰出来的洗脱体积,为了保险,都会适当增加洗脱时间,过渡后,再用新的流动相0.1-0.2ml/min的流速冲洗2-3倍体积,用DMF的话,可以升高柱温,他的粘度太大。尽量冲洗干净。

    zhywku66(zhywku66) 发表: 请问如何用DMF过渡。我现在流动相是六氟异丙醇,柱子是THF的。能给个详细的说明吗?
    第一次做,而且柱子是新柱子,不想让柱子这么快就不行了。
    谢谢!

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  • zhywku66

    第5楼2015/07/21

    就是说我原来的系统THF。现在用DMF先冲洗,然后再换HFIP。
    这是什么道理呢?为什么不直接用HFIP冲洗呢而要加上DMF作为过渡相?
    谢谢!

    小不董(doxw0323) 发表: 你能找到你的柱子的说明书吗?有流动相切换的操作说明的。
    一般过渡都是用过渡的溶液用0.1-0.2ml/min的流速,冲洗2-3倍柱体积,怎么计算呢,就是你在分析样品时容积峰出来的洗脱体积,为了保险,都会适当增加洗脱时间,过渡后,再用新的流动相0.1-0.2ml/min的流速冲洗2-3倍体积,用DMF的话,可以升高柱温,他的粘度太大。尽量冲洗干净。

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  • zhywku66

    第6楼2015/07/21

    真是专家呀。还有一个问题。如果是测量样品的分子量,样品的浓度是不是2000或1000ppm就可以了。我看说明书上说对于分子量高于25000的,是2000ppm, 分子量越大的,浓度要求越小,这有什么说法吗?不好意思,第一次做这个,不懂。谢谢!

    小不董(doxw0323) 发表: 你能找到你的柱子的说明书吗?有流动相切换的操作说明的。
    一般过渡都是用过渡的溶液用0.1-0.2ml/min的流速,冲洗2-3倍柱体积,怎么计算呢,就是你在分析样品时容积峰出来的洗脱体积,为了保险,都会适当增加洗脱时间,过渡后,再用新的流动相0.1-0.2ml/min的流速冲洗2-3倍体积,用DMF的话,可以升高柱温,他的粘度太大。尽量冲洗干净。

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  • 小不董

    第7楼2015/07/21

    应助达人

    分子量越大,颗粒越大,信号也越高,进入柱子的地方也越小,也就以为这柱容量越小,所以其浓度要求越低。

    zhywku66(zhywku66) 发表: 真是专家呀。还有一个问题。如果是测量样品的分子量,样品的浓度是不是2000或1000ppm就可以了。我看说明书上说对于分子量高于25000的,是2000ppm, 分子量越大的,浓度要求越小,这有什么说法吗?不好意思,第一次做这个,不懂。谢谢!

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  • zhywku66

    第8楼2015/07/21

    谢谢!那么为什么要用DMF作为过渡液呢。不能直接从THF切换成HFIP吗?就像您说的,冲洗时间长点。

    小不董(doxw0323) 发表: 分子量越大,颗粒越大,信号也越高,进入柱子的地方也越小,也就以为这柱容量越小,所以其浓度要求越低。

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  • 小不董

    第9楼2015/07/22

    应助达人

    THF和HFIP如果能互溶可能直接置换可以的。主要是要减少流动相对柱子填料溶胀系数不同产生的影响。

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  • zhywku66

    第10楼2015/07/23

    我发现THF 和HFIP是互溶的,你有什么建议吗?是不是先直接淋洗液换成HFIP,然后流速设为0.1ml/min,淋洗4小时,就可以了。
    另外我有另一个问题。如果柱子的shipping solvent是THF,但是淋洗液是HFIP,是不是也这样做就可以了呢。很难找到柱子的shipping solvent和淋洗液相同的柱子。
    非常感谢!

    小不董(doxw0323) 发表:THF和HFIP如果能互溶可能直接置换可以的。主要是要减少流动相对柱子填料溶胀系数不同产生的影响。

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