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液相色谱溶剂的选择与优化——紫外截止波长

happytiankong1

2015/12/21

由于HPLC应用最多的检测器是紫外检测器，用于检测有紫外吸收的样品。紫外检测器灵敏度高，不破坏样品，能与其他检测器有串联，可用于制备；对温度及流动相流速波动不敏感，可用于梯度洗脱。但只能检测具有π-π或p-π共轭结构的化合物。
使用紫外检测器时应考虑溶剂的截止波长。例如，当检测波长为220nm时，只能选用小于此截止波长的溶剂，如正戊烷、水、甲醇、乙腈等溶剂，而不能用截止波长小于220nm的溶剂，如二氯甲烷、氯仿等。
紫外截止波长定义为：“以空气作为参考物，在1cm吸收池内溶剂测得与参照物相等吸收的吸收波长”。
当某溶剂在流动相中占较小比例时则应根据具体情况决定。如浓度为10%（体积分数）或更低的溶液在截止波长附近检测仅会有一个0.1AU（吸收单位）的背景吸收。除了随之产生的噪声水平增加，线性工作范围减小和稳定性变差外，多数情况是可以接受的。
应该值得重视的是不同液相色谱厂家不同批号溶剂的光谱特性可能存在明显的差异。由于杂质种类和含量的区别，紫外截止波长及吸收系数都会有差异。空气中氧气溶解量的区别会明显产生不同的基线噪声。因此，除了尽可能使用符合色谱标准的溶剂外，溶剂使用前应该仔细过滤，用超声脱气，甚至用吹氦气的方法处理，以尽量去除杂质以及可挥发的溶解气体。

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valorb

第1楼2015/12/22

谢谢您的分享！

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happytiankong1

第2楼2015/12/22

希望对大家有帮助
valorb(654456) 发表:谢谢您的分享！

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dooby

第3楼2015/12/23

感谢分享好资料

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happytiankong1

第4楼2015/12/23

欢迎多来迪马板块，我们会经常写一些色谱相关文章与经验分享～
dooby(dooby) 发表:感谢分享好资料

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