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葡萄酒中白藜芦醇的测定解决方案

微雨燕双飞

2016/03/02

私聊

厂商论坛

葡萄酒中白藜芦醇的测定解决方案

参考《GBT 15038-2006 葡萄酒、果酒通用分析方法》

白藜芦醇是葡萄酒中重要的功能性成分，具有抗癌、抗氧化、抗菌、抗过敏、抗血栓、抗高血脂、消炎、扫除自由基等多种药理活性，受到国内外医学界和葡萄酒研究者的广泛关注。
国内外检测白藜芦醇含量的方法包括高效液相色谱法(HPLC)、气质联用法(GC-MS)、二次微分简易示波伏安法、毛细管电泳法(CE)、紫外荧光法、薄层色谱法等。其中，高效液相色谱法选择性强、灵敏度高、分离度好，是具有一定研究基础与推广意义的分析方法。国标方法《GB/T 15038-2006 葡萄酒、果酒通用分析方法》也有关于白藜芦醇的检测。由于不同红酒中的白藜芦醇含量具有很大的差异性，所以测定红酒中白藜芦醇含量可以为选择葡萄品种、改进酿造工艺、判断红酒真伪及质量等等方面提供重要的参考。
方法优势：
迪马科技建立固相萃取-高效液相色谱法检测红酒中白藜芦醇，对比国标方法：

本方法无需样品提取过程，直接过柱，操作简便；
样品调节pH后，使用ProElut BLC白藜芦醇检测专用固相萃取柱进行净化，高效液相色谱法检测；
方法定量限是1.0 mg/kg，优于文献方法2.0 mg/kg，回收率达85%以上，保证实验结果的准确性、重现性；
适用于各省市出入境、质检、疾控、食品药品检验所、第三方检测机构、食品检测机构、大型食品生产商、高校和科研院所等。

专用柱优势：
ProElut BLC 柱填料由多种吸附剂按照一定的比例分层填装而成，采用多种作用机理去除葡萄酒中酚类化合物，如黄酮、花色素、单宁等，适用于各类葡萄酒中白藜芦醇的检测；本产品是商品化的成品柱，吸附剂稳定性好，不受外界环境因素影响，保证实验结果的重现性和准确性；过柱过程中操作步骤简单，有机溶剂用量少，减少对人体的危害同时提高工作效率。
以下为详细解决方案，敬请参考！
葡萄酒中白藜芦醇的测定
1、适用范围
本方案适用于葡萄酒中白藜芦醇的检测，方法检出限是10.0 μg /L。
2、提取
取大约50 mL样品于100 mL烧杯中，用氨水调节样品pH至6.0，取出5 mL准备净化。
3、净化——ProElut BLC 6 mL（Cat.# 65918）

a活化：	依次加入5 mL甲醇、5 mL水，流出液弃去；
b上样：	加入待净化液，流出液弃去；
c淋洗：	加入5 mL 50%甲醇水，流出液弃去，推干小柱；
d洗脱：	加入5 mL甲醇，收集流出液；
e重新溶解：	将流出液在55 ℃下氮吹至低于1 mL，用流动相定容至1 mL，供HPLC分析。

4、色谱条件
色谱柱：Diamonsil C18(2), 250 × 4.6 mm, 5 μm（Cat.# 99603）
流速：1.0 mL/min
进样量：20 μL
柱温：30 ℃
检测器：UV 303 nm
流动相：乙腈：水=3：7
5、添加回收结果
葡萄酒中白藜芦醇的HPLC检测添加回收结果

基质	添加水平(mg/kg)	回收率(%)
张裕干红葡萄酒（窖藏2年）	1.0	91.66
张裕干红葡萄酒（窖藏2年）	5.0	95.48
经典王朝干红葡萄酒（窖藏）	1.0	90.18
经典王朝干红葡萄酒（窖藏）	5.0	94.75

白藜芦醇标准(5.0 mg/L)液相色谱图

白藜芦醇标准(25.0 mg/L)液相色谱图

添加水平为1.0 mg//kg 张裕干红葡萄酒中白藜芦醇检测的液相色谱图

添加水平为5.0 mg//kg 张裕干红葡萄酒中白藜芦醇检测的液相色谱图

张裕干红葡萄酒中白藜芦醇检测(空白样品)的液相色谱图

添加水平为1.0 mg//kg 经典王朝干红葡萄酒中白藜芦醇检测的液相色谱图

添加水平为5.0 mg//kg 经典王朝干红葡萄酒中白藜芦醇检测的液相色谱图

经典王朝干红葡萄酒中白藜芦醇检测(空白样品)的液相色谱图

葡萄酒中白藜芦醇的测定相关产品信息：

货号	名称	规格
样品前处理
65918	ProElut BLC	6 mL, 30/pk
244358	12管防交叉污染真空SPE萃取装置	12位
4803	1,3,6mL柱管通用连接器	15/pk
4806	考克(控制流量)	15/pk
99011	真空/正压两用泵，无油	1/pk
99013	抽滤瓶套装 (包括硅橡胶管2米,2L抽滤瓶及橡胶塞)	1/pk
30039	FitMax针头式过滤器 Nylon	13 mm,0.22 μm 100/pk
30040	FitMax针头式过滤器 Nylon	13 mm,0.45 μm 100/pk
标准品
53-R5010-100MG	白藜芦醇	100 mg
色谱柱及保护柱
99603	通用型反相液相色谱柱 Diamonsil C18(2)	250 × 4.6 mm, 5 μm
6201	EasyGuard C18 保护柱	10 × 4.0 mm 1/pk 2个柱芯+1个柱套
HPLC溶剂Ÿ缓冲盐Ÿ离子对试剂
50102	甲醇 HPLC级	4 L
50101	乙腈 HPLC级	4 L
通用色谱产品
52401B	瓶架/蓝色（现货）	50孔
52401A	瓶架/白色（现货）	50孔
1034	样品瓶（棕色/螺纹）	2 mL, 100/pk
1035	样品瓶盖/含垫（已经组装）	100/pk
H80465	HPLC 进样针	25 μL

红色产品货号#30039、#30040、#1034、#1035火热促销中