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请教，液相色谱测定含量柱压未变，保留时间差好多。大家遇到过这种情况吗？

aobowang

2017/10/31

液相色谱（LC）

测定天然维生素E软胶囊含量，对照品为α-生育酚条件如下：
1、液相流动相为甲醇：水 -96：4 流速0.8ml/min
2、色谱柱为C30 25cm
3、仪器为安捷伦1260，DAD检测器
前一天做对照品保留时间从22分逐渐变到18分，进6针保留时间无一能对上，保留时间逐渐减少。（压力和柱温都变化不大）
今天做对照品时间统一变到14分钟（流动相都是用的同一瓶），而且变化不大。柱压和柱温未有太大变化。请教大家遇到过这种情况吗？有可能是什么原因导致这种情况呢？

分
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夏天的雪

第1楼2017/10/31

应助达人

柱效可能变差或者流动相有变化

0

sdlzkw007

第2楼2017/11/01

应助达人

如果后来运行保留时间稳定，那么之前的情况貌似没有平衡好。

0

有水有渝

第3楼2017/11/01

应助达人

对照图是一个单一的峰还是有多个峰，峰形、峰面积或峰高变化大吗？这个流动相应该很快平衡才对

0

hujiangtao

第4楼2017/11/01

应助达人

多平衡一段时间试试

0

lavinia

第5楼2017/11/01

应助达人

1.标准品是什么，溶剂是什么，稳定与否；
2.流动相是在线混合还是事先混好的，如果是事先混好的，考虑是否混匀，是否平衡好。

0

weiweijunling

第6楼2017/11/01

应助达人

有可能前一次流动相没混匀，系统没平衡好。系统内有气泡

0

aobowang

第7楼2017/11/01

对照就是单一的一个峰，α生育酚
有水有渝(xky0230699) 发表:对照图是一个单一的峰还是有多个峰，峰形、峰面积或峰高变化大吗？这个流动相应该很快平衡才对

0

aobowang

第8楼2017/11/01

这个柱子是新的没用几次，流动相两次试验用的是一瓶的。
夏天的雪(bingwang228) 发表:柱效可能变差或者流动相有变化

0

夏天的雪

第9楼2017/11/02

应助达人

保留时间不断减少，说明仪器有问题，保留时间到14min，只要保留时间稳定就行，至于是什么原因导致保留时间变化就要排除一下仪器了，是否有漏液，柱平衡、流动相混合等
aobowang(aobowang) 发表: 这个柱子是新的没用几次，流动相两次试验用的是一瓶的。

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