注射用水溶性维生素的分析（2）——叶酸，生物素

注射用水溶性维生素的分析（2）

——叶酸，生物素

图1 CAPCELL PAK C₁₈ MGII（150 mm）分析对照品及供试品溶液结果

图2 CAPCELL PAK C₁₈ MGII（250 mm）分析对照品及供试品溶液结果

为使客户有更多色谱柱选择，本实验室也尝试了高碳载量的SUPERIOREX ODS色谱柱对对照品溶液及供试品溶液进行分析，同样能够得到待测组分与前后杂质峰的良好分离，分离度均在2.0以上；同时，我们也发现在分析供试品时，由于供试品中复杂基质的影响，叶酸峰会出现一定的拖尾现象（如图3）。

图3 SUPERIOREX ODS分析对照品及供试品溶液结果

我们也尝试使用可以在100%水系流动相下使用的高极性AQ色谱柱分析供试品溶液及对照品溶液，发现由于整体保留时间过长而使得生物素峰被包于杂质峰中，因此，我们尝试缩短整体保留时间，在药典规定范围内，提高流动相中有机相比例，将流动相比例由磷酸二氢钾缓冲溶液-乙腈（93：7）调整为（91：9），最终发现供试品中叶酸和生物素也能够与其相邻杂质峰取得良好分离结果，且分离度更佳（见图4）。

图4 CAPCELL PAK C₁₈ AQ S3分析对照品及供试品溶液结果

综上实验结果，使用中等极性的CAPCELL PAK C₁₈ MGII S5; 4.6mm i.d. × 150 mm（A4AB 07251）和高碳载量的SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d. × 150 mm（AZAB 12684）色谱柱，在客户原条件下，均能够实现叶酸、生物素及其相邻杂质间的良好分离；

使用高极性CAPCELL PAK C₁₈ AQ S3; 4.6 mmi.d. × 150 mm（A7AB 02100）色谱柱，在药典规定流动相可调整范围内，将流动相中磷酸盐缓冲液和乙腈比例调整为91 / 9（原条件为93 / 7），也可实现注射用水溶性维生素中叶酸和生物素及相邻杂质的良好分离。