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家兔热原试验心得
高秋荣
2018/07/01
国联质检团队
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家兔热原试验心得
西安国联质量检测技术股份有限公司
安评中心:刘朝君
热原,一般认为是能够导致机体发热的物质,分为内源性热原和外源性热原。研究表明,热原进入人体血液循环系统后,并不直接引起发热和其他毒性反应,但它可以使细胞释放内源性热原物质。这种内源性热原直接作用于中枢神经系统,刺激体温中枢,引起机体发热。检测热原的目的是将能够导致机体发热的物质控制在一定限度内,从而保证药物临床使用的安全。家兔热原检查和细菌内毒素检查法仍是热原检查的主要方法。但是由于生物体温变化是一个复杂的过程,所以家兔的质量、实验环境、实验设备、实验人员的操作等都会对温度的测定产生影响。
2015版中国药典1142热原检查法中,先对健康的家兔进行预筛,首先其体温要在正常范围内,即38.0-39.6℃,30min测一次温度,共测8次,其中最高和最低温差不超过0.4℃,这一步就相当于初步排除了由于家兔自身温度不稳定而导致体温升高的因素;其次,在给药前要再次测定家兔的正常体温,间隔30min,共测两次,且两次体温温差不能超过0.2℃,并以平均温度作为基础温度,用来判定是否由于热原导致体温升高的依据;当静脉注射给药后,以30min的间隔测量家兔体温,共测6次,用最高温减去基础体温,计算其升高温度,用以判定是否由于热原导致升温。
在整个实验过程中,家兔作为实验主体,其温度变化非常灵敏。所以在试验前要提前将其提前保定,减少家兔的应急反应;其次,在测温过程中家兔排泄时,温度变化也比较大,所以要避开其排泄,并再次测量。再者,温度计的深入长度和方向也有非常大的影响,所以实验过程中要注意测温的角度和深度。并要小心操作,避免由于不当操作引起家兔不适或者疼痛等引起的体温变化。
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