用安捷伦氨基酸分析包遇到的问题——基线鼓包和三组氨基酸达不到基线分离

应助达人

看来是样品检测过程中的基质残留物在柱子上，建议冲洗一下试试；基线分离原来可以的话就是色谱柱脏了，柱效下降的原因

冲洗一个晚上没有效果，很揪心。有时冲2天才冲干净，用不了多久 又有鼓包。柱子是刚买的。重现不了分析包分离效果

应助达人

1、按照您的描述，冲洗色谱柱后基线鼓包还是可以消失的，说明鼓包应该是污染引起的，还是考虑冲洗，是否可以在程序完成之后加一个高比例有机相冲洗的过程，或者延长18-22min的时间；2、空白色谱图中也有许多小峰，考虑污染或者试剂纯度不够引起的；3、重现性与方法和仪器有关的，您的色谱柱及仪器条件是否与安捷伦的一样，看分析包的谱图，部分峰的分离度本来就很低，稍微有些差别就可能影响他们的分离

应助工程师

NaH2PO4 是国药分析级，甲醇、乙腈是色谱纯，这些换成进口LC/MS 级别试试。

应助达人

冲洗可另设梯度，流量小谢更有利。

每天走完样品 都会设置冲洗 先高比例的水相 后面是高比例的乙腈低流速冲洗30-40分钟。还是冲不掉，反接低流速的乙腈冲洗7小时 还是冲不干净，扎心

1、鼓包问题应该是多肽酸水解后直接衍生进样 对色谱柱造成污染，可以将酸水解后的样品进行前处理（不知道该怎么前处理，过一根C18），或者增加高比例有机相冲洗（不过实际操作上，冲洗的效果不理想，100%纯乙腈冲洗一天也没用）2、试剂用的是天地，没有默克的。我想想换换试剂，无奈 3、色谱柱、衍生试剂、标准品全部购买安捷伦的，色谱参数按照安捷伦提供的分析包设置，一模一样。