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色谱柱的清洗和再生

吕梁山

2018/08/30

色谱柱的清洗和再生
反压升高、保留时间改变、柱效下降，这些表征现象都在提示柱床内或者移动相表层有
沉积物存在。大多数时候，可以按照正确的清洗步骤来处理解决以上问题。值得注意的是，
在大多数情况下越早动手清洗（再生）效果越好。
强吸附性物质总是会停留在色谱柱的溶剂导入端，许多情况下反向冲洗会有助于色谱柱
的清洗。值得指出的是，装填效果好的色谱柱是不会因为逆流操作而降低性能的。
在反相色谱中沉积物通常会以填料床表面吸附物或沉淀的形式存在。对于不同类型的杂
质可采用的冲洗溶剂详见下表：

*作为最后的选择，使用量不超过 10 倍柱体积，操作最后用乙醇/1%水性乙酸（50： 50）酸
化固定相填料。
再生操作步骤：
1. 针对杂质选择合适的溶剂/溶剂混合比。在杂质成分未知时，权当强极性/离子物质情况
处理以防止沉淀的进一步产生。
2. 降低移动相流速（正常流速的 10%），尽可能用反相工作模式并略微提高一点工作温度
（<40℃），冲洗量上限为 10 倍柱体积。
3. 反压出现异常时，选择在常用流速下频繁查看反压的变化情况。
4. 如果问题没有好转，使用针对带正电荷极性和/或大分子沉积物的冲洗条件。如果使用十
二烷基磺酸钠作为冲洗液，事后需用纯四氢呋喃，二甲基甲酰胺或者乙腈对色谱柱做彻
底冲洗。
5. 如果问题顽固存在。请联系我方技术支持寻求进一步帮助。
本文来源于上海鲲霆生物网站

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wsy18

第1楼2018/08/30

这是应对Kromasil色谱柱的吗？

0

吕梁山

第2楼2018/08/31

对，这个是来源于kromasil的官方代理商网站
wsy18(wsy18) 发表:这是应对Kromasil色谱柱的吗？

0

wsy18

第3楼2018/09/11

一般再生的柱子柱效多少会有些下降。

0

wsy18

第4楼2018/09/16

不同厂商的产品方法也会有差异。

0

WUYUWUQIU

第5楼2018/09/17

应助达人

会有所下降的
wsy18(wsy18) 发表:一般再生的柱子柱效多少会有些下降。

0

WUYUWUQIU

第6楼2018/09/17

应助达人

原理上应该是一样的
wsy18(wsy18) 发表:不同厂商的产品方法也会有差异。

0

WUYUWUQIU

第7楼2018/09/17

应助达人

这个还是有一定技术难度的，普通的检测实验室不一定能操作

0

wsy18

第8楼2018/09/17

大都还是显著下降。
WUYUWUQIU(wulin321) 发表: 会有所下降的

0

wsy18

第9楼2018/09/17

但是方法的变化万千。
WUYUWUQIU(wulin321) 发表: 原理上应该是一样的

0

WUYUWUQIU

第10楼2018/09/18

应助达人

是的是显著下降
wsy18(wsy18) 发表: 大都还是显著下降。

0

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