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【分享】出现非特异性扩增带

生命科学仪器综合讨论

  • 　　PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致，或大或小，或者同时出现特异性扩增带
    与非特异性扩增带。非特异性条带的出现，其原因：一是引物与靶序列不完全互补、
    或引物聚合形成二聚体。二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低，及PCR循环次数 过多
    有关。其次是酶的质和量，往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶 则不出
    现，酶量过多有时也会出现非特异性扩增。其对策有：①必要时重新设计引 物。②减低
    酶量或调换另一来源的酶。③降低引物量，适当增加模板量，减少循环次 数。④适当提
    高退火温度或采用二温度点法(93℃变性，65℃左右退火与延伸)。
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    +关注 私聊

  • youridname

    第1楼2007/01/04

    其实最容易出现假阳性的原因还是污染。要注意防止污染才是根本。当然酶也很重要。正如楼上所说。

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    +关注 私聊

  • licca1021

    第4楼2007/09/16

    引物设计不合适吧

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