仪器信息网APP

选仪器、听讲座、看资讯

立即体验

当前位置：仪器社区 >生命科学仪器 > PCR > 帖子详情

非洲猪瘟自检实验室布局的思考

栀子花开

2019/07/03
分析者端木花之队

1、疫情严峻
2018年8月3日我国确诊首例非洲猪瘟疫情，随后不断有疫情报告。2019年4月24日海南省万宁市和儋州市发生非洲猪瘟疫情，宣告内地31个省（市、自治区）无一幸免。
2、自检要求
农业农村部、市场监管总局等单位根据非洲猪瘟疫情态势，连续发布文件，要求屠宰场、猪肉制品加工企业、规模猪场、种猪场开展非洲猪瘟自检。那么，这些企业如何根据实际，合理布局自检实验室呢？
3、条件有限
根据有关规定，一个规范的分子生物学实验室，必须具备试剂制备区、标本制备区、扩增区和产物分析区，对于荧光定量PCR来说，扩增区和产物分析区可以合二为一。如此规定，对于上述企业来说，无疑是不现实的。

4、因陋就简
那么，如何在实验室面积不大和投入不多的情况下，尽可能防止分子生物学实验交叉污染和做好生物安全呢？一般来说，上述企业实验室能安排一间约20平方米的办公室，专门用来开展非洲猪瘟检测，已属不易。考虑到这些实验室一般都是利用成品检测试剂盒，采用核酸免提技术，简单地粗提核酸后加入体系即进行扩增，建议将实验室分为三个区，即缓冲区、核酸粗提区、扩增检测区。如下图所示：

5、具体思路
5.1缓冲区：设立缓冲区的目的，主要是防止交叉污染。进入缓冲区后，穿上鞋套，脱下外套，拉开推拉门进入核酸粗提区。
5.2核酸粗提区：在此区域内应配备安全柜、实验台、试剂保存冰箱、金属浴或水浴锅、移液器、吸头等。进入该区域后，穿上工作服，戴上手套，在生物安全柜内进行核酸粗提工作。核酸粗提后，离开本区域前将工作服换下，拉开推拉门进入扩增和检测区。
5.3扩增和检测区：在此区域内应配备实验台、荧光定量PCR仪、移液器和高压灭菌器。进入本区域时换上本区专用工作服。将粗提后的核酸加入反应体系，放入荧光定量PCR进行扩增。扩增结束后，应将产物及废弃物放入高压灭菌器进行处理。离开本区域前将工作服换下。
6讨论
6.1本思路在条件有限的情况下，尽可能做到分区操作，并设立了缓冲间，最大程度避免了交叉污染的发生。
6.2按照本思路设计时，核酸粗提区和扩增检测区之间并无缓冲。为解决这个问题，需要在以下几个方面予以注意：
一是可以在扩增检测区增加一台排风扇，形成一定的负压，防止扩增检测区气流进入核酸粗提区造成污染；
二是进入扩增检测区时，须提前打开排风扇形成负压，离开扩增检测区关上推拉门后方可关闭排风扇电源；
三是千万不能打开扩增产物管盖，以免扩增产物逸散形成气溶胶污染；
四是扩增结束后必须尽快对产物进行高压灭菌；
五是离开一个分区前必须脱下本区专用工作服，进入一个分区后必须穿上本区专用工作服，避免不同分区工作服混用。
只要通过种种防污染措施的实施，能最大程度避免交叉污染的发生，提高非洲猪瘟检测工作的质量。
6.3尽管采取了种种预防措施，但毕竟本思路存在着先天的缺陷，有条件的实验室最好还是按照分子生物学的要求，进行严格的分区设计。

相关话题

赛孚瑞化学试剂

第1楼2019/07/04

学习

0

yayicuo

第2楼2019/08/05

应助达人

写的很好，很有借鉴意义，如果能提供下载就好了。

0

沧海青城

第3楼2019/08/06

应助达人

应该是时下最需要的，支持

0

栀子花开

第4楼2019/08/06

应助达人

需要下载什么内容请告知，若能提供当尽绵薄之力
yayicuo(v3253952) 发表:写的很好，很有借鉴意义，如果能提供下载就好了。

0

yayicuo

第5楼2019/08/06

应助达人

就是这篇文章呀。
栀子花开(qzxmsy) 发表: 需要下载什么内容请告知，若能提供当尽绵薄之力

0

栀子花开

第6楼2019/08/07

应助达人

原创-非洲猪瘟自检实验室布局的思考.doc

1

近期热榜

热门活动

猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐

品牌合作伙伴

日立科学仪器

珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）

珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）

日本电子株式会社

赛默飞世尔科技

马尔文帕纳科

上海仪电科仪

梅特勒托利多

布鲁克核磁

举报帖子

点赞用户

好友列表

加载中...

正在为您切换请稍后...