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食用油中赭曲霉毒素A的测定

月旭

2019/09/25

赭曲霉毒素A （Ochratoxin A）是曲霉属和青霉属的真菌形成的次级代谢产物，属烈性的肾脏毒和肝脏毒，广泛存在于各种食物中，谷物及其副产品是赭曲霉毒素A的主要来源。动物实验表明摄入了被这种毒素污染的饲料后，会发生急性或慢性中毒症。防止污染赭曲霉毒素A的食品和饲料直接或间接地进入人类食物链，加强对赭曲霉毒素A的检测十分重要。
我们今天做的就是菜籽油中的赭曲霉毒素A的检测。
适用范围
适用于食品中赭曲霉毒素A的测定（本实验用菜籽油为基质）。
参考标准：《GB 5009.96-2016 食品安全国家标准食品中赭曲霉毒素A的测定》
提取步骤
1）称取5.0 g（精确至0.1g）样品于离心管中，加入1g氯化钠，10ml提取液，振荡，超声20min，离心8000r/min 10min，移取上清液；往原先离心管中再加入10ml提取液，再提取一次，移取上清液后；再加入5ml提取液，再提取一次，合并三次上清液。
2）准确移取15mL上清液，加入30mL磷酸缓冲液，混匀，并过玻璃纤维滤纸，待净化。
SPE净化步骤
SPE柱：月旭赭曲霉毒素A免疫亲和柱规格： 3mL。
活化：将赭曲霉毒素A免疫亲和柱放置到室温，然后将小柱中的缓冲液流出，弃去；
上样：取净化液30mL上样，控制流速，不宜过快，弃去；
淋洗：10mL磷酸缓冲液，10mL水，弃去，抽干小柱；
洗脱：2mL甲醇洗脱，收集于15mL离心管中，抽干
将洗脱液置于45℃下氮吹吹干，用乙腈-2%乙酸水溶液复溶并定容到1mL，上机测定。
色谱条件
色谱柱：月旭Ultimate®XB-C18 4.6×150mm,5μm；
流动相：A冰乙酸-水（2+100），B-乙腈；
等度洗脱条件：A-B(50+50)；
流速：1.0mL/min；
柱温：30℃；
进样量：10μL；
检测波长：激发波长：333nm；发射波长：460nm。
谱图和加标回收率结果

图1.赭曲霉毒素A 2ng/mL图谱

图2.赭曲霉毒素A 5ng/mL图谱

图3.样品加标1μg/kg图谱

图4.样品加标2.5μg/kg图谱

表2.加标回收表

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第1楼2019/09/26

应助达人

食用油中赭曲霉毒素A的测定

0

mengzhaocheng

第2楼2019/09/26

应助达人

黄曲霉毒素的毒性太大了，能够检测真是太好了

0

emmalee07

第3楼2019/09/28

应助达人

广泛存在于各种食物中，谷物及其副产品是赭曲霉毒素A的主要来源。

0

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