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DNFB做氨基酸,如何选择流动相及其洗脱梯度

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  • 2,4-二硝基氟苯来做氨基酸,文献中有用A:0.02mol/LNa2HPO4+0.02mol/LNaH2PO4,流B:甲醇:乙腈=10:90作流动相,也有A:0.05mol/L乙酸钠,B:乙腈-水=1:1(V:V)做流动相,该如何选择呢?有没有用DNFB做过氨基酸的亲们啊,谢谢指导~
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  • junxi2008

    第1楼2019/11/05

    流动相A: 乙腈/水(1:1, v/v)溶液; 流动相B: 0.05 mol/L醋酸钠(用冰醋酸调pH为6.4)水溶液(含1% N,N-二甲基甲酰胺);
    流速: 1 mL/min;
    柱温箱温度: 35 ℃;
    检测波长: 360 nm;
    洗脱梯度: 0~5 min,30%~35%B;5~10 min,35%~40%B;10~15 min,40%~55%B;15~20 min,55%~65%B;20~23 min,65%~75%B;23~25 min,75%~98%B;25~35 min,98%B;根据色谱柱不同,还可对梯度做适当优化,一般选择普通C18柱。

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