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未知样品怎样确定HPLC条件?

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  • 未知样品怎样确定HPLC条件?
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  • pqyhhd3344

    第1楼2019/12/03

    未知化合物应先进行结构确认,了解该化合物的结构特点,再根据结构特点选择合适的色谱方法。
    一般为:
    根据溶解性选择溶解溶媒;
    根据紫外扫描确定检测波长;
    根据检测波长选择流动相有机相种类(一般是甲醇或乙腈,低波长吸收最好选乙腈);
    缓冲盐的种类一般为磷酸盐或醋酸盐,浓度不大于0.05mol;
    流速一般从1.0开始;
    柱温室温最好。
    进样量要根据主峰的响应值来确定,一般为定量限的5000倍;
    由此可初步建立一个色谱条件,再根据洗脱情况进行优化。

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