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蛋白质的同步荧光光谱

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  • 蛋白质的同步荧光光谱分析,使用的是日本的岛津5301.
    在设置实验条件时,激发波长=295nm(样品是蛋白),发射波长是个范围,△ λ=60nm,发射波长=295+60nm~500nm,这样的设置没错吧?

    但是文献中蛋白的峰的位置应该在300nm以内,,求问各大神这是什么情况啊。貌似设置没问题,那扫描就从355nm开始,出不了峰啊


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  • sunka5724

    第1楼2019/12/15

    按照图中曲线来看,BSA的荧光峰应该在310nm~330nm差不多,按照你的设置来说激发是从295nm开始扫的,间隔是60nm,那么对应的发射波长第一个点就是355nm了,这样的话你的扫描的范围应经不包括那个峰了。建议将激发波长设置为200nm~600nm(范围大点可选择的余地就大),那么对应的发射波长的范围是260nm~660nm这样才能包含发射峰。这样的话在不同的猝灭剂下强度才会发生变化,峰位才会出现移动,才能说明基团周围微环境的改变。

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