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紫外用光栅光谱仪对蛋白质纯品的检测

xmgulong

2020/01/12

用wds-8a的光栅光谱仪对蛋白质纯品进行检测。我用0.9%的nacl配制牛血清蛋白溶液（50微克、100微克、200微克/ml等8组），准备用透射光强来计算吸光度值，从而得到回归方程。可是在检测中，发现蛋白质在220nm附近有最低的透射比（用0.9%nacl做基线），而在280nm附近的透射虽然也不是完全100%的，但是比220nm处的大了不少。我本来准备用280nm处的峰值做计算的，可是值那么低，做出来的结果会不会很不准了？215nm处的峰值时肽键的吸收，当然也有215-225差值的计算方法，可是这种方法不是只有在蛋白质浓度较低的情况下才适合么？
不知道是我的样品有问题，还是仪器的问题？

xmgulong

第1楼2020/01/12

蛋白质还没做过，只是提示一下楼主，你如果要确定峰在哪儿的话最好在一起上做一个峰值的确定，要不然不知道峰在哪儿，实验就白做了！扫峰也就不到1分钟就可以了！

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