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请教各位关于高效液相色谱的事宜

shenfengjuan

2020/01/15

我最近在使用ODS的柱子，采用柱前衍生法测多糖的单糖组成，在实验的过程中遇到问题。
首先我使用的是北京东西分析的ODS柱子150mm,采用柱前衍生法混合了八种单糖，做了一个混标，使用磷酸盐缓冲液（ph6.7）-乙腈，跑出来是下面这样的图，前面几个样品跑的很好，但是最后三个峰就是分不开，我尝试加大了磷酸盐的比例，加大1%，2%3%始终是分不开，又减少了相同的比例，还是分不开。请教各位这是什么原因？是否是因为柱子太短。
然后，我使用了依利特ODS2柱子，250mm,使用了相同的流动相，跑出来如下的图片，如图2，，峰型不好看，而且后面分的不是很好，请教各位这是什么问题？是由于我的流动相的问题吗？还是柱子的问题，我调试了很多的流动相比例，熬夜做了一宿实验，还是做不出来，不知道是什么原因？是柱子坏了吗？已经用了好几年了，请求各位赐教。

最后，请问各位有没有用赛默飞的氨基柱跑柱前衍生后的单糖组成的吗？如何设置的流动相？问题比较多，已经连续实验一周，筋疲力竭，倘若是柱子的问题，那我就。。。。。感谢各位！

shenfengjuan

第1楼2020/01/15

先跑跑各个单糖试试，看看单独出峰是个什么情况，最好每个单糖选三四个不同浓度

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