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高效液相色谱求助

xxm0612

2020/02/16

我最近在做高效液相制备色谱，用反相柱，甲醇-水为洗脱剂，有几个问题不太明白，请大家帮忙看看。
1.样品在甲醇中的溶解性不好，可以用其他的试剂溶解么？（在氯仿中溶解行好）
2.图中两个峰挨得很近，增加水的量可以把它们分开，为什么？
3.图中明显是一个峰，为什么在3D图中显示的是重合的两个峰（即同一个位置上下两个圈）？
4.进样量加大时，峰型发生改变，甚至原本分开的峰连在了一起，为什么?

xxm0612

第1楼2020/02/16

甲醇不行，就换乙腈试试，一般液相的有机相我们就用这两种，很少用其他的有机溶剂溶解。两个峰挨得近流动相水多加能分开，说明延迟了各自的出峰时间，并且后者的出峰时间延迟的多点，所以原来不是很分开的峰分开了。液相出峰只能表明这个峰有一种及多种溶解性相似的物质存在，并不是一个峰就对应一个物质，一个峰可以有多个物质，换合适的条件在理论上是能分开的。进样量增大时，这个峰整个的出峰时间（宽度）就会增加，原来挨的近的峰自然会沾到一起，而且增大进样量峰型也会变丑，会出现平顶山或拖尾的现象。

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