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肽分离制备

sunka5724

2020/03/11

最近在分离纯化蛋白水解肽，想找到一种有生物活性的肽（具体哪种活性还没想好，呵呵），看文献中，基本都有这么一步：
反相-HPLC分离-制备-做活性。

可是文献中用的色谱柱通常也是4*250mm的C18柱，液相也是普通的安捷伦，这么小的柱子，加上这么小的进样量（通常20uL）怎么制备样品啊？况且还要做抗氧化、抑菌等活性，这要收集多少次啊！想不明白！！
想用制备色谱吧，一是买不起制备柱，二是有了制备柱普通液相也不支持啊，毕竟进样量只有20uL。
请教各位高手，有没有什么好的方法制备啊？
我们有普通的低压分部收集系统（蠕动泵、检测器、采集器、层析柱），能不能用高效分离的C18柱替代层析柱啊？
其他方法给推荐下。

sunka5724

第1楼2020/03/11

既然用小柱子制备试验的话肯定不是20μL进样，而是高浓度过量进样，然后依据出峰情况分别取样，确定哪个时间段能得到合格产品，然后再考虑放大，我也不太懂，只能说这么多了

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