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液相，C18色谱柱，流动相:甲

shenfengjuan

2020/03/12

液相，C18色谱柱，流动相:甲醇:水=95:5，流速:1ml/min，饲料中维生素D3测定。出现了以下问题还希望各位老师帮忙指导一下。
1.标准品保留时间提前了。
2.甲醇空白样2.5min出峰了。
3.峰都连在一起，无法准确积分，所用方法为国标方法。如图一。
冲洗方法:
第一步:甲醇:水=90:10 1h
第二步:甲醇:水=1:0 1h
第三步:流动相比例 1h

该色谱柱之前用于泛酸钙测定，流动相:乙腈:0.05%磷酸水溶液=5:95 流速1ml/min

shenfengjuan

第1楼2020/03/12

酸碱度会影响保留时间，pH越小保留时间越提前。你之间用的是磷酸水做流动相也许是残留。

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