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RE:如何应用SPE技术,制备气相分析样品?
莉羽蓝翡翠
2020/07/16
私聊
气相色谱(GC)
解答:
具体要看萃取小柱的使用说明以及须过固相萃取小柱样品的性质:
1.一般采用正己烷 丙酮来活化,用真空或用注射器给一个压力,赶走柱内的气泡。
2.然后用弱的溶剂来平衡,一般采用水或缓冲液。
3.上样,注意这步的流速不能太大,否则样品没有和填料充分交换,会影响回收率的。
4.以上几步需注意溶液的液面,不能抽干。
5.洗杂质:根据样品的性质,洗脱溶剂的强度和pH的选择应是保证能尽可能的洗去杂质而不会洗下样品为好。可以做一下洗脱曲线,找到最佳的溶剂。
6.洗脱样品:可以选择相对较强的溶剂,保证样品能充分洗脱下来,收集洗脱液,我们一般采用纯甲醇或乙腈,若需富集的话,可以挥干后再进样。
洗脱剂的选择:选择洗杂质的溶剂时,可多选择几个有机相和水相的比例,几个pH值的溶剂来洗脱,比较样品回收率和杂质峰大小,权衡一下,选择合适的比例。 杂质多的话,可以先用一定浓度的有机溶剂沉淀一下蛋白,上清再上样,但是要注意加入有机溶剂的比例,保证上样后不会被直接洗脱。
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