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色谱峰问题

液质联用(LCMS)

  • 今天用了甲醇1:5沉淀蛋白处理了空白血浆加标准品和内标,把标准品和内标的提取离子图分别拍了一下,想请教各位大神,这些图怎么跟我标准品纯进样差那么多,这些图的现象是什么都不清楚,有没有大神告知一下这些图的问题叫啥,改从哪方面解决啊,流动相是0.1%甲酸水-甲醇。梯度洗脱。
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  • hujiangtao

    第1楼2020/10/08

    应助达人

    没太明白楼主的问题,是样品和纯标样离子和保留时间不一致吗?可以试着在空白基质里加入标准品,看一下离子丰度比和保留时间,如果空白加标和阳性样品差距较大,则假阳性可能性很大

    纯标样峰型可以的话可能是基质干扰引起的,感觉样品的目标峰里面有基质干扰

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  • 黄屁屁

    第2楼2020/10/08

    不是,是纯标准品进样呢跑出来的峰还不错,在生物基质中跑出来的峰就怪怪的,也不清楚这是什么问题

    hujiangtao(hujiangtao) 发表:没太明白楼主的问题,是样品和纯标样离子和保留时间不一致吗?可以试着在空白基质里加入标准品,看一下离子丰度比和保留时间,如果空白加标和阳性样品差距较大,则假阳性可能性很大

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  • hujiangtao

    第3楼2020/10/08

    应助达人

    生物样品基质复杂,有干扰也正常。有的农残受基质影响也很大

    黄屁屁(Insm_3bd2778d) 发表:不是,是纯标准品进样呢跑出来的峰还不错,在生物基质中跑出来的峰就怪怪的,也不清楚这是什么问题

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  • 黄屁屁

    第5楼2020/10/09

    那请问怎么改善呢

    hujiangtao(hujiangtao) 发表:生物样品基质复杂,有干扰也正常。有的农残受基质影响也很大

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  • 黄屁屁

    第6楼2020/10/09

    不一样,但是乙睛溶解出来跑的峰很丑

    valorb(654456) 发表:溶剂一样吗?

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  • wei0815

    第7楼2020/10/09

    溶剂不一样导致的

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  • weiqing

    第8楼2020/10/09

    应助达人

    此外样品的前处理净化也比较关键,需要多优化一下。

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  • welewolf

    第9楼2020/10/09

    应助达人

    楼主的问题应该就是基质效应太高了,建议优化前处理步骤:包括适当降低样品的称样量;适当增加提取后定容的体积

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  • 陈三

    第10楼2020/10/09

    这些物质保留都很弱,溶剂强度大的话峰就会比较丑且提前(与标品相比),也就是溶剂效应会比较明显。如果不置换溶剂的话,可以尝试降低进样量到改善至可接受为止,当然这伴随着灵敏度逇降低!或者可以尝试改变梯度延后出峰,或者更换其他色谱柱等都可以试下。

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