OECD 490

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测试编号 490：使用胸苷激酶基因的体外哺乳动物细胞基因突变测试
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体外哺乳动物细胞基因突变试验可用于检测化学物质引起的基因突变。该 TG 包括两种不同的体外哺乳动物基因突变检测，需要两种特定的tk杂合细胞系：用于小鼠淋巴瘤检测 (MLA) 的 L5178Y tk+/- 3.7.2C 细胞和用于 TK6 检测的 TK6 tk+/-细胞。使用tk基因座检测到的遗传事件包括基因突变和染色体事件。

将悬浮或单层培养中的细胞暴露于至少四种可分析浓度的测试物质，无论是否有代谢活化，持续一段合适的时间。它们被传代培养以确定细胞毒性并允许在突变体选择之前进行表型表达。细胞毒性通常通过测量处理期后培养物的相对克隆效率（存活率）或相对总生长来确定。将处理过的培养物在生长培养基中维持足够长的时间，这是每个选定基因座和细胞类型的特征，以允许诱导突变的近乎最佳的表型表达。突变频率通过在含有选择剂的培养基中接种已知数量的细胞来检测突变细胞来确定，并在没有选择剂的培养基中确定克隆效率（活力）。在合适的孵育时间后，计数菌落。

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