多杀霉素a出峰时间后移

应助达人

卧槽，见识了，保留时间也太短了吧，时长3mini.。看看你的管路有无变动流动相ph有无变化，剩下的这两点比较可疑

应助达人

看一下流动相pH值是否有变化，色谱柱没变的话一般保留时间和流动相pH关系很大；液相方法3分钟有些短，前面梯度洗脱程序有些变化率太快，可以适当延长低有机相比例到搞高有机相的时间，让梯度平缓一些

应助达人

之前做方法验证，多杀a出峰时间1.35min，过了半年再做样品检测，仪器设备柱子都是之前的，出峰时间后移到2.25，流动相，色谱柱也换了新，但是，还是没见改善，方法总共3min，请问还可能出现的原因在哪里呢？

建议查看是否其他物质都发生了整体后移。如果是整体后移，建议查看压力是否和之前一致、柱效是否因为长久未做或者时间问题导致降低。
如果是仅仅这个物质后移，建议查看方法、流动相配置尤其是pH（如有缓冲盐之类的也应考虑试剂本身）等条件是否改变。

好的，谢谢

谢谢，多谢你

应助达人

流速发生变化， 检查是否有漏;
更换泵的密封，排净气泡
色谱柱尚未平衡， 至少用10倍杜体积的流动相平衡色谱柱:
缓冲溶液容量不够，使用的缓冲溶液浓度应保持在20mM至50mM之间
流动相组成发生变化，检查泵；检查滤网；
流动相中的溶剂互溶性差，要防止流动相的挥发或降解；
色谱柱温度发生变化，使用色谱柱恒温箱 ；
杂质在色谱柱中“堆积，” 冲洗色谱柱;

好的，谢谢