C18柱耐水比例求助

应助达人

氨基酸极性大、分子量小，很难在c18上保留。C18柱子不适合用纯水作流动相的原因主要是：
（1）当采用有机溶剂作冲洗剂时，由于硅胶的表面高度不均一，即使极微量的水吸附在其表面上时，也会使吸附活性大大降低。尽管水在非极性和弱极性的有机溶剂中溶解度很小，但如此微小的含水量的变化就会导致柱负荷和保留值的显著变化。
（2）C18属于疏水性基团，而疏水性简单说就是容易抱团。C18长链在纯水条件下会抱团，抱团之后就很难再分开，导致柱效下降，因为C18里面被抱团在内部的那一部分就失去作用了，且不容易恢复。
（3）那为什么加一些有机相（比如5%甲醇或乙腈）就可以呢？因为有机相在C18抱团的时候会起到阻碍作用，所以流动相中要加一定量的有机相。
（4）抱团作用（疏水性）和柱子本身有关：一些原来老填料的柱子有的要求水相最多不超过80%，现在的填料进过改进有了能“阻挡抱团”的基团，一般都能耐受95%水相了；此外碳载量高的柱子（如C18）一般更怕水，容易抱团，碳载量低的相对要好一些。
（5）很多公司也推出了能耐受100%水相的C18柱（如安捷伦AQ柱、Waters的T3柱），里面添加了极性基团，抱团作用被有效遏制，所以可以用纯水流动相。