【实战宝典】普通PCR出现假阳性结果的可能因素有哪些？

（1）引物设计问题 若选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，在进行PCR扩增时，引物也会与非目的条带结合，扩增出的PCR产物为非目的序列，出现假阳性。同时，靶序列太短或引物太短也容易出现假阳性。需重新设计引物。　

（2）样品核酸交叉污染。实验人员在向PCR体系中加入模板DNA（样品核酸）时，因未离心等原因，发生气溶胶污染，导致假阳性。

（3）扩增产物出现交叉污染。出现这种污染的原因有：一是在扩增完成后立即打开PCR管盖，此时管内温度略高，很容易发生孔位间气溶胶污染，同时，含有大量核酸片段的气溶胶进入空气中，容易造成环境污染，影响后续实验。二是在跑胶加液时，加液量过大，导致胶孔液体溢出，相邻胶孔交叉污染，出现假阳性条带。