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求助!液相色谱法测氨甲环酸

  • Ins_ff2aebb0
    2022/11/09
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 我现在在做氨甲环酸含量的测定 ,用的是2020版药典的方法,是岛津的柱子,色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.23%十二烷基硫酸钠溶液(取磷酸二氢钠18.3g,加水800ml溶解,加三乙胺8.3ml混匀后,再加入十二烷基硫酸钠2.3g,振摇使溶解,用磷酸调节pH值至2.5,加水至1000ml,摇匀)-甲醇(60:40)为流动相;检测波长为220nm;进样体积10μl。标准说出峰在13min,我的6-7min就出了,而且每一针出峰时间总是持续延长。不知道解决办法是什么
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  • robin_clhx

    第1楼2022/11/09

    药典没有给出具体的柱长、膜厚和内径,只是给出填料的大类。使用不同品牌的同类型的色谱柱都会有很大的差异,更何况是不同的规格。因此,如果按现有条件能出峰,并且峰形没有问题,调节好流速把目标物调整到指定的保留时间即可。如果是每一针的保留时间有不同,需要让仪器在工作时的流动相更长时间的平衡,这个流动相的pH值和涉及使用的离子对试剂是比较难平衡的,最好平衡30分钟以上才开始测试。

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  • xiaogumd11

    第2楼2022/11/09

    应助达人

    每一针出峰时间总是持续延长,就是保留时间不稳定,一是看系统有没有气泡,微量级,二是将色谱柱平衡时间延长30分钟以上

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  • Ins_ff2aebb0

    第3楼2022/11/09

    我每次实验 平衡时间都很长的 可还是保留时间漂移

    robin_clhx(robin_clhx) 发表:药典没有给出具体的柱长、膜厚和内径,只是给出填料的大类。使用不同品牌的同类型的色谱柱都会有很大的差异,更何况是不同的规格。因此,如果按现有条件能出峰,并且峰形没有问题,调节好流速把目标物调整到指定的保留时间即可。如果是每一针的保留时间有不同,需要让仪器在工作时的流动相更长时间的平衡,这个流动相的pH值和涉及使用的离子对试剂是比较难平衡的,最好平衡30分钟以上才开始测试。

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  • Ins_ff2aebb0

    第4楼2022/11/09

    系统中微量级的气泡要怎么看呢

    xiaogumd11(v3247983) 发表:每一针出峰时间总是持续延长,就是保留时间不稳定,一是看系统有没有气泡,微量级,二是将色谱柱平衡时间延长30分钟以上

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  • robin_clhx

    第5楼2022/11/09

    确认一下比例阀的问题,尝试手动按比例混合好流动相,单通道走样验证

    Ins_ff2aebb0(Ins_ff2aebb0) 发表: 我每次实验 平衡时间都很长的 可还是保留时间漂移

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  • Ins_ff2aebb0

    第6楼2022/11/09

    好的谢谢 这个方法我试过 这个流动相混合瓶子里会出白色絮状物

    robin_clhx(robin_clhx) 发表: 确认一下比例阀的问题,尝试手动按比例混合好流动相,单通道走样验证

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  • robin_clhx

    第7楼2022/11/09

    混合了出来絮状物,这个问题有点麻烦了。
    看看柱压,之前的压力是否一致,等度的压力线应该是从开始到结束都几乎是一条直线,在±2Bar以内都是正常的,出现递增或者递减的趋势就是有问题的了

    Ins_ff2aebb0(Ins_ff2aebb0) 发表: 好的谢谢 这个方法我试过 这个流动相混合瓶子里会出白色絮状物

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  • Ins_ff2aebb0

    第8楼2022/11/09

    压力没有问题的 几乎是没有变化的

    robin_clhx(robin_clhx) 发表: 混合了出来絮状物,这个问题有点麻烦了。
    看看柱压,之前的压力是否一致,等度的压力线应该是从开始到结束都几乎是一条直线,在±2Bar以内都是正常的,出现递增或者递减的趋势就是有问题的了

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  • Ins_49786965

    第9楼2022/11/09

    不同厂家的十二烷基硫酸钠溶解度不一样,换别的厂家试试,建议国药

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