1 所示，加入 CA 后细胞的状态发生了显著的变化，在 3 h 时就已经出现细胞形态的改变；当 18 h 时，细胞已经有死亡的迹象。
图 CA 刺激 A549 细胞，终浓度为 0 μM、300 μM，不同时间细胞状态图
CA对 A549细胞活力的影响
本文设置了终浓度为 0、50、100、300、500、1000、1500、2000、3000 μM 的 CA 浓度梯度，细胞在 5% CO2、37 ℃的培养箱中无血清培养6 h，最终得出了浓度依赖型的曲线。如图 3-2 所示，加入 600 μM 的 CA 对细胞的抑制率可达到 50%左右；当 CA 加入浓度为 2.5 mM 时，细胞的存活率只有 20%；当 CA 的加入浓度为 3 mM 时，细胞已经死亡。
以 A549 为例，本文选用不同浓度（0、20、50、100、300、500 μM）的 CA 处理1 h 后的细胞裂解液与生物素孵育，进一步进行免疫印迹分析。如图 所示， Westerningblotting 分析表明，随着 CA 浓度增加，曝光后的条带逐渐加深，这进一步证明了 CA 已成功结合到蛋白上，从而在蛋白上引入可被酰肼生物素标记的醛基，同时也可进一步证明酰肼化学法能够实现CA 靶蛋白的标记。
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