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方法学中选择性评价

Ins_01291f89

2023/07/04

液质联用（LCMS）

生物样品方法学建立中验证部分（MRM模式），选择性评价中选择6个空白样品，与空白样品加LLOQ和内标进行评测。是一定要要求空白样品中目标物相同保留时间内没有出峰？感觉有些空白血浆就是会在同一时段出峰的

分
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Ins_5e649cb5

第1楼2023/07/05

我觉得如果单纯的空白出峰，可能是方法或者仪器哪里的问题，一个比较好的方法，这种情况是不会存在Blank存在干扰的，选择性我通常会用6个不同批次的单个基质去测，接受标准是化合物在定量下限的20%以内，内标5%

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hujiangtao

第2楼2023/07/06

应助达人

一般要求空白内有内源性目标物，如果实在找不到绝对干净的空白，至少进10针空白样品根据SD计算得到的检出限要低于方法检出限。

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Leuchi666

第3楼2023/07/07

一般说专属性的话，要求空白在目标保留时间内不能有峰，如果真的有，可以要求检测限样品大于两倍的空白峰面积，才能说无干扰。有试过CNAS的空白血浆吗？我们做贝伐珠的也是这样，如果是找特征肽段做MRM的话，可以看看其他的肽段

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Ins_01291f89

第4楼2023/07/07

空白要有内源性目标物怎么理解？
hujiangtao(hujiangtao) 发表:一般要求空白内有内源性目标物，如果实在找不到绝对干净的空白，至少进10针空白样品根据SD计算得到的检出限要低于方法检出限。

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Ins_01291f89

第5楼2023/07/07

没有，我用的是大鼠血浆。cnas的也会出现这种情况??
Leuchi666(Ins_0bb5bacc) 发表:一般说专属性的话，要求空白在目标保留时间内不能有峰，如果真的有，可以要求检测限样品大于两倍的空白峰面积，才能说无干扰。有试过CNAS的空白血浆吗？我们做贝伐珠的也是这样，如果是找特征肽段做MRM的话，可以看看其他的肽段

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Ins_01291f89

第6楼2023/07/07

大于两倍？有文献或指南参考嘛，学习一下
Leuchi666(Ins_0bb5bacc) 发表:一般说专属性的话，要求空白在目标保留时间内不能有峰，如果真的有，可以要求检测限样品大于两倍的空白峰面积，才能说无干扰。有试过CNAS的空白血浆吗？我们做贝伐珠的也是这样，如果是找特征肽段做MRM的话，可以看看其他的肽段

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Ins_01291f89

第7楼2023/07/07

想达到blank没有目标物，有些时候情况不允许??
Ins_5e649cb5(Ins_5e649cb5) 发表:我觉得如果单纯的空白出峰，可能是方法或者仪器哪里的问题，一个比较好的方法，这种情况是不会存在Blank存在干扰的，选择性我通常会用6个不同批次的单个基质去测，接受标准是化合物在定量下限的20%以内，内标5%

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Ins_01291f89

第8楼2023/07/07

定量下限的20%，指的干扰物质是同一保留时间空白的响应嘛
Ins_5e649cb5(Ins_5e649cb5) 发表:我觉得如果单纯的空白出峰，可能是方法或者仪器哪里的问题，一个比较好的方法，这种情况是不会存在Blank存在干扰的，选择性我通常会用6个不同批次的单个基质去测，接受标准是化合物在定量下限的20%以内，内标5%

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Ins_5e649cb5

第9楼2023/07/08

是的，只有确定干扰的出峰时间和化合物以及内标出峰时间一致，才算干扰，不在同一时间，当然不算干扰。基质方面，我这用的都是北京维通利华的基质。虽然我不是开发方法的，只是个分析的??。因为我这做验证阶段，还会用第一个DB来判断污染，如果第一个DB中化合物响应超过定量下限的20%，内标的5%，如果超出这个实验就算是失败的所以，我没有遇到过DB中超限的，要不然改改梯度，流动相，把干扰峰分开？
Ins_01291f89(Ins_01291f89) 发表:定量下限的20%，指的干扰物质是同一保留时间空白的响应嘛

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