LC-MS/MS的发展受敏感性与特异性等多种因素影响, 主要原因是现有免疫检测技术用于特定待测物质时成本过高或存在干扰物质交叉反应。免疫分析中的干扰物质主要有3类:代谢产物、结构类似物以及与目标分析物活性不同的几何异构体[17]。在美国, 当缺少经食品与药品监督管理局(food and drug administration, FDA)认证的免疫分析方法或检测性能难以满足预期时, 可选择质谱法进行检测。
当然, 质谱检测对服务于内部开发即实验室自建检测项目(laboratory developed test, LDT)的技术要求较高, 开发成熟的检测方法需采用同位素内标, 并备有证明文件。LDT也需满足由美国FDA、美国临床实验室改进修正法规(the Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, CLIA'88)、美国临床实验室标准化协会(the Clinical and Laboratory Standards Institute, CLSI)、欧洲药品管理局(European Medicines Agency, EMA)及美国各州法规所发布的标准及规定。
LDT中有各类检测维生素D的方法。鉴于分析样本制备、色谱分析、电离等各检测步骤的差异, 实验室间的标准化措施极为有限。这种差异也导致不同实验室间检测结果无法互认。美国国家标准和技术研究院(the National Institute of Standards and Technology, NIST)已发布了相应标准, 与监管机构推出的室间质评计划联合致力于理顺实验室间检测结果的一致性。维生素D亦可利用免疫学方法进行检测, 有多篇文献对2种方法的性能进行了比较[23, 24, 25, 26, 27]。免疫检测方法的不足、对LC-MS/MS方法的开发需求以及开发过程中的问题, 在对维生素D的检测中均得到体现[28]。