液相色谱出峰杂乱是否代表方法不合适？

应助达人

样品浓度过高了，感觉像过载

最后一个图吗？我是15%质量分数的糖，进样量10微升，流速1ml/min，这个量也会导致过载吗？

应助达人

液相色谱柱的承载量，按照质量来算，都是纳克级的

应助达人

低流速冲柱子试试，分叉有可能是柱子填料未饱和有干的部分所致。

应助达人

1、问题一：峰分叉的原因很有可能跟你进样浓度有关，你的谱图峰面积都3500以上了，那峰面积至少几万甚至几十万，这个浓度太高了，很容易出现分叉峰，建议控制浓度，或者减小进样量，改为2ul。另外你的色谱柱如果使用时间久了，柱效降低，也会造成分叉，但是我认为第一种可能性更大，你可以按照我说的方法试试，将进样量改为2ul，或者对样品进行稀释10倍。
2、问题二：其实你的出峰杂峰很少，不多，不像是基质带来的。而且你的纵坐标比例比较小，类似于方放大了，这种波动更像是流动相带来的，比如你设置了梯度洗脱，如果流动相组成比例发生改变，是会造成基线升高或者降低的，楼主可以尝试优化洗脱梯度，如果能分开，出峰好，改成等度也未尝不可。另外对于10min那没有出峰，那基本上就是没有，不过要看你样品是怎么前处理的，如果样品量小，也可能浓度太低测不到。

就是不太合适

应助达人

直接分析反应液，有可能带来一些高吸收成分。建议反应液做一些前处理，以排除不必要的干扰。

问题1，前两个图，明显就是两个标品进样浓度太大，过载，峰平头且分叉。保持进样量10ul，建议稀释10倍再进样。
问题2，最后一个图。进样后，基线明显低于不走样时。建议优化梯度洗脱方法。在关键物质出峰处，保证基线平缓。
另外，为什么要用盐酸调pH？盐酸对液相管路有腐蚀，不太建议用。是否可以用磷酸，醋酸等？