rna定量测定是什么

RNA定量测定是指通过各种实验手段来确定RNA样品中总RNA的浓度以及可能的质量评估。这是一个在分子生物学研究中非常基础且重要的步骤，因为只有确保RNA样品的质量和浓度，才能保证后续实验（如反转录、PCR扩增、基因表达分析等）的可靠性和可重复性。

以下是一些常用的RNA定量测定方法：

1. **紫外吸收光谱法（UV Spectrophotometry）**：
这是最常见的RNA定量方法之一。通过测量样品在260纳米处的吸光度来估计RNA的浓度。由于DNA、蛋白质和其他一些小分子也会在这一波长下吸收光线，因此还需要通过计算260/280 nm或260/230 nm的吸光度比值来评估样品的纯度。

2. **荧光染料结合法（Fluorometric Assays）**：
使用特定的荧光染料（如RiboGreen）与RNA结合，然后通过荧光强度来定量RNA。这种方法比紫外吸收法更加敏感，且能减少DNA和其他杂质的影响。

3. **凝胶电泳法（Gel Electrophoresis）**：
通过琼脂糖凝胶电泳来评估RNA的质量和完整性。观察是否有明显的28S和18S rRNA带，以及这些带的比例是否正常（通常28S rRNA带的强度约为18S rRNA带的两倍），以此判断RNA是否完整。

4. **微流控电泳（Microfluidic Electrophoresis）**：
使用商业化设备（如Agilent Bioanalyzer或Life Technologies QuantStudio）来评估RNA的质量和完整性。这种方法可以同时提供RNA浓度和RNA完整性数（RIN值）。

5. **实时定量PCR（qRT-PCR）**：
虽然主要用于基因表达水平的定量，但在某些情况下也可以用来间接估算特定mRNA的相对量。

选择哪种方法取决于实验的具体需求、实验室条件以及RNA样品的特点。通常，为了确保结果的可靠性，建议同时采用多种方法来综合评价RNA的质量和浓度。