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如何正确设置流式细胞仪的运行参数
Ins_f018d2ce
2024/10/08
我为蓝天做贡献
私聊
实验室建设
了解您的样品特性和实验目标至关重要。不同的细胞类型、标记物以及实验需求将直接影响流式细胞仪的参数设置。因此,在开始实验前,务必对样品进行充分的了解和分析。
根据样品特性和实验需求,选择合适的激光器和滤镜组合。激光器提供光源,而滤镜则用于选择特定波长的光,从而检测特定的标记物。
在设定PMT(光电倍增管)电压时,需要找到一个平衡点。过高的电压可能导致信号饱和,而过低的电压则可能使信号过弱,难以区分。因此,应根据实际情况调整PMT电压,以获得最佳的分辨率和灵敏度。
设置合适的阈值和门控也是关键。阈值用于区分信号和背景噪声,而门控则用于选择感兴趣的细胞群体。这些设置将直接影响后续的数据分析。
不要忘记进行补偿设置。由于不同标记物可能使用相同的检测通道,因此需要进行补偿以消除交叉干扰。补偿的设置应基于质检珠或已知样品进行校准。
总结,正确设置流式细胞仪的运行参数需要综合考虑样品特性、实验需求以及仪器性能。通过仔细调整激光器、滤镜、PMT电压、阈值、门控和补偿等参数,可以确保获得准确、可靠的实验结果。
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