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细胞培养箱和储存条件
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2024/10/09
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常用设备综合讨论
培养箱
培养箱的作用是为细胞生长提供合适的环境。培养箱大小应足够满足实验室需要,具有强制空气循环,并且具有温度控制系统,可将温度波动控制在 +0.2℃范围内。不锈钢培养箱易于清洁,耐腐蚀,尤其适合使用湿化空气进行培养的情况。虽然细胞培养箱的无菌性要求不如细胞培养通风橱严格,但是必须经常对其进行清洁,以免培养的细胞受到污染。
培养箱种类
目前培养箱有两种基本类型,即:干式培养箱和湿式二氧化碳培养箱。干式培养箱较为经济,但是需要将细胞在密封的培养瓶中培养,以防止培养基蒸发。在干式培养箱中放置一只水盘可以增加一定的湿度,但是无法精确控制培养箱内的空气条件。湿式二氧化碳培养箱较为昂贵,但是能够准确控制培养条件。这种培养箱可用于培养皿或多孔板中细胞的培养,这种培养方式需要将空气控制在高湿度、高二氧化碳压力的状态。
储存
细胞培养实验室应设置多个储存区,分别用于存放液体(如培养基和试剂)、化学品(如药物和抗生素)、耗材(如一次性吸管、培养瓶和手套)、玻璃器皿(如培养基瓶和玻璃吸管)、特殊设备以及组织和细胞。
玻璃器皿、塑料制品和特殊设备可置于架子上或抽屉中于室温下存放:但是,所有培养基、试剂和化学品均应按照标签说明存放。
一些培养基、试剂和化学品对光线敏感,尽管其可耐受光照状态下正常的实验室使用但是不使用时必须将其存放在暗处或者用铝箔包裹起来。
冰箱
对于小型细胞培养实验室,家用冰箱(最好是不含自动除霜冷冻室的冰箱)即可供试剂和培养基于 2-8℃下存放之用,而且价格低廉。大型实验室,采用专供细胞培养的冷藏室较为合适。应确保定期打扫冰箱或冷藏室,以防污染。
冰柜
大多数细胞培养试剂可于-5℃ 至-20℃ 下储存:因此,可以采用超低温冰柜(即:-80℃冰柜)存放多数试剂。与实验室冰柜相比,家用冰柜是一种较为便宜的选择。尽管大多数试剂可耐受自动除霜(即:自动解冻) 冰柜内的温度波动,但是有些试剂(例如抗生素和酶)则应储存在无自动除霜功能的冰柜中。
低温储存
随着传代次数的增加,连续培养的细胞系可能发生遗传不稳定:因此,必须准备工作细胞储备并将其存放于低温状态下(更多信息,请参阅第 37 页的“细胞冻存”部分)。不得将细胞存放于 -20℃或 -80℃冰柜中,因为细胞存放于上述温度条件下活力会迅速降低。
目前主要有两种液氮储存系统,即:蒸汽相和
液相
储存系统,分别采用广口和细口储存容器。蒸汽相系统可降低冻存管爆炸危险,储存生物危害性物质时应使用该系统,
液相
系统通常具有更长的静态保温时间,因而更为经济。
细口容器中液氮蒸发速度较慢,更为经济,而广口容器存取方便,储存容量较大。
细胞计数器
细胞计数器是定量监测细胞增殖动力学的必备工具,实验室内同时培养 2-3 种以上细胞时,细胞计数器能够提供巨大的便利。
Countess”自动细胞计数器是一款台式设备,它采用标准台盼蓝摄入技术,可准确测定细胞数量和活性(活细胞、死细胞和总细胞),测定每个样品只需不到1分钟的时间。Countess"自动细胞计数仪计数所需的样本量与您目前使用的血球计数器所需量相同,且不到一分钟即可完成一个样本的典型细胞计数,适用于各种真核细胞。
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