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灵芝孢子中三萜类成分UPLC_Q_TOF_MS/MS定性分析和 HPLC含量测定研究

zhangyongmei

2024/10/16

液质联用（LCMS）

灵芝孢子为多孔菌科真菌赤芝Ganoderma lucidum 或紫芝G.sinense的干燥成熟孢子，在提高免疫力、抗肿瘤、抗氧化等多方面有较强的生理活性，三萜是其活性成分之一，但目前没有可靠的含量测定方法。因此，该研究采用UPLC-Q-TOF-MS/MS 定性分析灵芝孢子中的三萜类成分，并建立了同步测定灵芝孢子中5种三萜类成分含量的HPLC 方法。在负离子模式下，通过与对照品保留时间、紫外光谱、裂解碎片比对，从灵芝孢子中确认了9种三萜类成分，分别是灵芝酸I、灵芝烯酸C、灵芝酸C2、灵芝酸C6、灵芝酸G、灵芝烯酸B、灵芝酸B、灵芝酸A、灵芝酸H;通过与文献比较，从灵芝孢子中推测了3种三萜成分，分别为赤芝酸E、(Z)-6-[(3S,5R,7S,10S,12S,13R,14R,17R)-12-乙酰氧基-3,7-二羟基-4,4,10,13,14-五甲基-11,15-二氧代.2,3,4,5,6,7,10,11,12,13,14,15,16,17-十四氢-1H-环戊烯并[a]菲-17-基1-2-甲基-4-氧代庚-5-烯酸和ganoderin A。以
UltimateHPLCXS-C18色谱柱(4.6 mmx250 mm,5μm)为固定相，乙腈-0.072%磷酸水为流动相，梯度洗脱，流速1.2 mL·min·，检测波长257 nm，柱温40℃，该条件下5种三萜类成分可实现同步定量测定，方法学考察结果符合含量测定要求。灵芝烯酸C、灵芝酸 C2、灵芝酸 C6、灵芝烯酸B和灵芝酸H这5种成分分别在0.93~16.08、3.44~23.88、4.28~59.40、1.40~16.16、3.53~61.20ug·mL呈良好的线性关系(R2>0.999)，平均回收率在79.53%~93.60%，RSD在4.7%~7.6%。15 批不同产地的灵芝孢子原粉和4批不同产地破壁灵芝孢子中5种三萜类成分的含量差别较大，15批不同产地原粉的5种成分总量在0.44~16.25 μg g;4批不同产地的破壁灵芝孢子三萜总量在0.52~3.57 μg·g'。该文建立的新方法操作简便、结果可靠，可以用于灵芝孢子中三萜类成分的准确测定，为灵芝孢子的质量评价提供了方法依据。

附件：

10 灵芝孢子中三萜类成分UPLC_Q_..._析和HPLC含量测定研究_乔灵芝.pdf

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