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亲和层析法的原理

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2024/10/28

综合仪器讨论

亲和层析法是一种利用共价连接有特异配体的层析介质来分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其他分子的技术。其原理主要包括以下几个步骤：
- ??配基固定化?：配基与载体偶联，结合成具有特异亲和性的分离介质。这一步骤是亲和层析的核心，通过化学方法将具有特定亲和性的配体共价连接到载体上，形成固定的相。
- ??吸附样品?：将待分离的蛋白质混合物通过层析柱，目标蛋白会特异性地结合到固定化的配体上，而其他非目标蛋白则随流动相流出层析柱。
- ?样品解吸?：通过改变流动相的条件（如pH值、离子强度等），使结合在配体上的目标蛋白解吸下来，从而实现分离。

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