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如何提高液相色谱分离度
Insp_3dd89f61
2024/10/28
私聊
综合仪器讨论
提高?
[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p]
液相色谱
[/url]分离度的方法?
?增加色谱柱长度?:增加色谱柱的长度可以改善分离效果。
?更换扩散性较差的溶剂?:使用扩散性较差的溶剂可以提高分离度。
?延长分离时间?:延长分离时间可以增加组分在色谱柱中的停留时间,从而提高分离度。
?由强到弱调整流动相?:先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验,然后根据出峰情况调整有机溶剂的比例。
?三倍规则?:每减少10%的有机溶剂的量,保留因子约增加3倍,通过调整有机溶剂的比例来优化分离效果。
?粗调转微调?:当分离达到一定程度后,将有机溶剂的调整量从10%降低到5%,逐步微调以达到最佳分离效果。
?调整流动相的?
pH值
?:根据物质的酸碱度调整流动相的pH值,可以改善峰形和分离度。
?更换色谱柱?:如果上述方法无效,可以考虑更换不同类型的色谱柱,如反相色谱柱C18可以更换为C8柱或苯基柱。
流动相的选择和调整
?流动相的性质要求?:理想的
液相色谱
流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。
?流动相的pH值调整?:对于弱酸或弱碱样品,通过调节流动相的pH值来抑制样品的解离,增加组分在固定相上的保留,并改善峰形。
?选择合适的缓冲液?:根据被分析物的pKa选择合适的缓冲液,以获得尖锐的峰形和良好的分离效果。
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