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如何提高液相色谱分离度

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2024/10/28

综合仪器讨论

提高?[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p]液相色谱[/url]分离度的方法?
- ?增加色谱柱长度?：增加色谱柱的长度可以改善分离效果。
- ?更换扩散性较差的溶剂?：使用扩散性较差的溶剂可以提高分离度。
- ?延长分离时间?：延长分离时间可以增加组分在色谱柱中的停留时间，从而提高分离度。
- ?由强到弱调整流动相?：先用90%的乙腈（或甲醇）/水（或缓冲溶液）进行试验，然后根据出峰情况调整有机溶剂的比例。
- ?三倍规则?：每减少10%的有机溶剂的量，保留因子约增加3倍，通过调整有机溶剂的比例来优化分离效果。
- ?粗调转微调?：当分离达到一定程度后，将有机溶剂的调整量从10%降低到5%，逐步微调以达到最佳分离效果。
- ?调整流动相的?pH值?：根据物质的酸碱度调整流动相的pH值，可以改善峰形和分离度。
- ?更换色谱柱?：如果上述方法无效，可以考虑更换不同类型的色谱柱，如反相色谱柱C18可以更换为C8柱或苯基柱。
流动相的选择和调整
- ?流动相的性质要求?：理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。
- ?流动相的pH值调整?：对于弱酸或弱碱样品，通过调节流动相的pH值来抑制样品的解离，增加组分在固定相上的保留，并改善峰形。
- ?选择合适的缓冲液?：根据被分析物的pKa选择合适的缓冲液，以获得尖锐的峰形和良好的分离效果。

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