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【求助】我应该选择什么固相萃取柱为好,谢谢!

前处理综合讨论

  • 大家好:
    我现在做磺胺氯吡嗪在鸡组织中残留检测方法的建立,跑标样用的柱子是C18柱,流动相是乙腈:甲醇:冰醋酸:三乙胺:超纯水=30:10:0.8:0.3:58.9,峰形很好,出峰时间也不错。现在遇到一个问题,在样品前处理过程中,用何种类型的固相萃取柱效果好?我昨天用了一下C18柱试了一下,发现上柱液里有药物,淋洗液中也有药物,洗脱液有药物。具体做的过程如下:
    活化:1ml二氯甲烷,1ml甲醇,1ml水
    上样:10%甲醇(内含0.8:0.3冰醋酸:三乙胺)溶解药物
    淋洗:15%甲醇(内含0.8:0.3冰醋酸:三乙胺)溶液
    洗脱:90%甲醇(内含0.8:0.3冰醋酸:三乙胺)溶液
    我很困惑,请各位为我指点迷津,先谢谢了!!
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  • 家有宝贝儿

    第1楼2007/07/25

    跑标样采用的是恒梯度吗?
    如果是恒梯度,建议前处理时将上样液和淋洗液中甲醇的浓度都降低。

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  • xujuanjuan99

    第2楼2007/09/12

    活化:1ml二氯甲烷,1ml甲醇,1ml水
    上样:10%甲醇(内含0.8:0.3冰醋酸:三乙胺)溶解药物
    淋洗:15%甲醇(内含0.8:0.3冰醋酸:三乙胺)溶液
    洗脱:90%甲醇(内含0.8:0.3冰醋酸:三乙胺)溶液
    1.你先看看你活化柱子的时候甲醇有没完全的渗透整个固定相,平衡柱子的水中你也可以加点酸碱,但离子强度要小于30mM。
    2.溶解样品的溶剂中甲醇的量你可减少点,上样样你也可以减少,可能是由于上样太多;如果你的药物极性很大,你可以在你的溶样里加5%的NaCl再上样。
    3.上样速度要慢
    4.上样完后干柱2min的样子然后再冲洗
    5.冲洗液中甲醇的量你再减少点,冲洗溶剂的也可以适当减少

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