采用安捷伦 Poroshell 120 色谱柱快速分析大鼠血浆中蟾蜍二烯内酯及其代谢物

2018/07/23   下载量: 1

方案摘要

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应用领域 医疗/卫生
检测样本 全血/血清/血浆
检测项目
参考标准 暂无

蟾酥为蟾蜍科动物中华大蟾蜍 (Bufo gargarizans Cantor) 或黑眶蟾蜍 (Bufo melanostictus Schneider) 等的耳后腺及皮肤腺分泌的白色浆液 , 经加工干燥而成。其性味辛温,有毒,具有解毒、消肿、醒神、开窍、强心和止痛等作用。蟾酥的主要化学 成分有蟾蜍内酯类、吲哚碱类、甾醇类及多肽类等。其中已分离鉴定的蟾蜍二烯内酯 类化合物逾 40 种,被认为是蟾酥的主要药效成分。蟾蜍内酯类成分在体内的吸收和 代谢研究对阐明蟾酥的药理作用以及临床用药安全具有重要的指导意义。然而,蟾酥的成分复杂,给药后经动物肠道菌群及体内代谢后成分更为复杂,而且含量低,对仪器及分析技术提出了更高的要求。近年来 , 液相色谱 - 质谱联用技术被广泛应用于中药及其代谢物分析,其优点在于能够实现复杂成分的在线检测和鉴定。质量高分辨和多级串联功能的质谱仪与液相色谱联用,为成分鉴定的准确性提供了更有力的保障。本研究利用高效液相色谱(使用 Poroshell 120 快速高效色谱柱)- 高分辨质谱联用仪分析鉴定了蟾蜍内酯类化 合物口服给药后在大鼠血浆中的成分及其代谢物,发现血浆中含有原药中 24 种蟾蜍二烯 内酯类成分,本研究结果为蟾酥活性成分的体内药理毒理作用研究提供了理论依据。

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前言

    孔雀石绿(MG)和结晶紫(CV)是主要用于染色的人工合成色素。此外,由于它们具有抗菌性,所以被用来治疗水生生物的传染性疾病,特别是鱼和鳗鱼。然而,MG 是一种疑似致癌物质,目前在水产养殖中被禁止使用[1]。

    本文采用安捷伦Bond Elut Plexa PCX 固相萃取(SPE)柱对鱼肉中的孔雀石绿(MG)、结晶紫(CV)及其代谢物隐色孔雀石绿(LMG)和隐色结晶紫(LCV)进行提取,并对其进行LC/MS/MS 分析。表1 列出了这4 种化合物的名称和化学结构。

结论

    本文建立了同时测定孔雀石绿、结晶紫及其代谢物隐色孔雀石绿和隐色结晶紫的方法。研究表明安捷伦Bond Elut Plexa PCX 固相萃取柱可以有效地纯化和富集水产品如鱼中的染料。基于空白加标测定所得的回收率和重现性能满足鱼中染料残留检测相关标准的要求。本方法将杂质与基质效应最小化,对目标化合物的定量分析未产生干扰。


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