方案摘要
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治疗性多肽和蛋白质的表征及杂质分析需要联合使用色谱分离和质量选择检测。然而，多肽和蛋白质的色谱分离方法通常使用 MS 不兼容的流动相。本应用简报采用多中心切割 (MHC) 二维液相色谱 (2D-LC) 作为质量选择检测的自动脱盐工具。在第一维中，使用 MS 不兼容的流动相根据 USP 39 分析多肽胰高血糖素。然后在第二维中进行自动脱盐和质量选择检测。
在药物研究和开发中，治疗性多肽和蛋白质受到了越来越多的关注。这些大分子的复杂结构和杂质谱为其表征和杂质分析带来了难题。要解决这些难题，需要联用色谱分离和质量选择检测 (MSD) 来分析上述分子1。多肽和 蛋 白 质 的 色 谱 分 离 方 法 通 常 使 用MS 不兼容的流动相，例如含有高浓度盐或非挥发性缓冲液的流动相1,2。为了使这些色谱方法能够使用 MS 检测，通常需要将方法转换为 MS 兼容的流动相或收集馏分脱盐后进行离线MS 分析1。
在二维液相色谱 (2D-LC) 中，第二维 可 作 为 有 效 的 脱 盐 工 具 ， 从 而 实现使用 MS 不兼容流动相的色谱方法与 MS 检测的在线联用1。配置二维液相色谱软件A.01.04 的 Agilent InfinityLab 二维液相色谱解决方案为使用安捷伦单四极杆质谱仪的 MSD 联用 2D-LC 提供了从方法设置到数据分析的完全集成的解决方案。分流阀可在每次第二维 ( 2 D) 运行开始时自动将第一维 ( 1 D) 流动相中的盐或缓冲液分流至废液。Agilent AdvanceBio 脱盐反相小柱可用于在第二维中进行快速有效脱盐，如之前的应用简报所述3。除了脱盐之外，当使用的标准长度色谱柱和条件可提供与第一维分离不同的选择性时，还可在第二维中实现进一步分离2。
胰高血糖素是一种含有 29 种氨基酸的多肽类激素，用于低血糖的紧急治疗4。根据 USP 39，在流动相中使用磷酸钾缓冲液，通过 LC 结合 UV 检测进行胰高血糖素的有机杂质分析5。而这与 MS 检测不兼容。本应用简报采用多中心切割 (MHC) 2D-LC，在第一维中根据 USP 39 进行胰高血糖素分析，在第二维中进行自动脱盐和 MSD检测。
文献贡献者
使用 Agilent 8697 顶空进样器和 8850 GC-FID 系统进行制药行业的残留溶剂分析
利用透射拉曼光谱对软凝胶胶囊进行定量与鉴定测试
检测婴儿配方奶粉、牛奶和鸡蛋中的 30 种全氟烷基和多氟烷基化合物
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