方案摘要
方案下载| 应用领域 | 制药/生物制药 |
| 检测样本 | 预防类生物药品 |
| 检测项目 | |
| 参考标准 | / |
使用 Agilent Cary 3500 紫外-可见分光光度计以快速升温速率获得可重现的解链温度 (Tm ) 数据
通过提高温度可以诱导双链核酸分离成单链。在一定温度下，碱基对之间的氢 (H)键会断裂。热解链实验利用了核碱基之间H 键数量的差异。例如，DNA 核苷酸的腺苷与胸腺嘧啶 (A=T) 之间以及鸟嘌呤与胞嘧啶 (GΞC) 之间的 H 键，或 RNA 中腺苷与尿嘧啶 (A=U) 和 G 与 C 碱基之间的H 键。由于 GΞC 核苷酸含有三个氢键，解离 GΞC 所需的热能大于双键碱基对。含有更多 GΞC 对的 DNA 和 RNA 将在更高的温度下解链。因此，解链温度 (T m )可以准确指示样品中的碱基对组成（GΞC与 A = T/U = T的比率）。
在核酸的药物发现、开发和生产过程中，Tm 通常被研究人员和制造商用作二级鉴定测试（QC 检查）。解链温度通常通过紫外-可见分光光度法测量，因为在核酸的最大吸收峰 260 nm 处，单链核酸的吸光度高于双链核酸[1]。以鲱鱼精子 DNA 为例，图 1 显示，与 25 °C 相比，260 nm处的吸光度在 90 °C 时明显更高。
文献贡献者
单克隆抗体的高分离度、高通量体积 排阻色谱分析
采用液相色谱-四极杆串联飞行时间高分辨质谱分析锂电池中的碳酸酯有机溶剂组分
使用 Agilent 5800 ICP-OES 测定固态 电解质锂镧锆钽氧 (LLZTO) 中的 主量元素
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