摘要： 本实验重现了食品中八种人工着色剂检测的实验方案，样品经超声去除二氧化碳，
Cleanert® PWAX 固相萃取柱净化，Venusil® XBP C18 (L)色谱柱（4.6 × 150 mm，5 μm，150 Å）
分离，0.02 mol/L 乙酸铵溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱，外标法进行定量。结果表明，八种
着色剂添加量为 0.01 mg/kg、0.05 mg/kg 时，回收率在 60% ~ 110%之间，能够满足检测要求。
关键词:八种着色剂；Cleanert® PWAX 固相萃取柱；Venusil® XBP C18 (L)色谱柱
人工合成着色剂又称人工合成色素，常以苯、甲苯等为原料，先制备色素中间
体，再将一种或两种中间体进行磺化、偶合、缩合和偶氮化等化学反应而制成。着
色剂的添加使用在现代饲料工业和现代畜牧水产养殖业中日益普遍。通过着色剂改
变饲料的色泽，特别是在日益增加使用非传统饲料原料的情况下，添加着色剂以便
掩盖某些非传统饲料原料（如菜籽饼粕等）的不良颜色，迎合用户心理习惯，增加
市场竞争力；同时，也起到刺激食欲和诱食的作用；还可以通过着色剂改善畜、禽、
水产品的色泽，提高其商品价值。如添加着色剂使肉鸡皮肤、禽蛋卵黄、牛奶的黄
油以及鱼虾等水产品的肉质具有更鲜艳、美观的色泽和更优良的产品质量，迎合消
费者的心理。生产企业违禁添加着色剂，长期食用此类产品将严重危害人体健康。
甲醇为色谱纯；实验用水为超纯水；乙酸铵、氨水均为分析纯； 博纳艾杰尔产品应用案例
2%氨化甲醇溶液：量取氨水 2 mL，加甲醇溶解并稀释至 100 mL，摇匀；
0.02 mol/L 乙酸铵溶液：称取乙酸铵 1.54 g，用水溶解并稀释至 1000 mL。
一次性无菌注射器；PTFE 针式过滤器(0.45 μm，直径 13 mm)；
Cleanert® PWAX 固相萃取柱：200 mg/3 mL。
称取 10 g 样品放入 100 mL 烧杯中，超声去除二氧化碳。
先将 Cleanert® PWAX (200 mg/3 mL)小柱分别用 6 mL 甲醇，6 mL 水溶液活化
平衡；然后将待净化液过柱；用 6 mL 水和 6 mL 甲醇洗柱，弃去全部流出液，小柱
用真空泵抽干；最后用 6 mL 2%氨化甲醇洗脱。收集洗脱液于 40℃下氮气吹干，用
1 mL 水溶解残留物，过 0.45 µm 亲水滤膜后待测。
注：上述操作步骤可在 Qdaura®卓睿全自动固相萃取仪上完成。
色谱柱：Venusil® XBP C18 (L)，5 μm，150 Å，4.6 × 150 mm；
流动相：A相-0.02 mol/L乙酸铵溶液，B相-甲醇；
注：波长梯度 1 适用于柠檬黄、胭脂红、诱惑红、酸性红、赤藓红；波长梯度 2 适用于苋菜红、日落黄、亮蓝
本实验重现食品中八种着色剂的残留量检测的实验，并结合高效液相色谱对可
口可乐中八种着色剂残留物的含量进行了测定。对于加标量为 0.01 mg/kg、0.05
mg/kg 的样品进行了检测，回收率在 60% ~ 110%之间，符合要求。
Venusil® XBP C18 (L) 5 μm，150 Å，4.6 × 150 mm 1 支 VX951505-L
Cleanert® PWAX 200 mg/3 mL 50 支/pk WA2003
针式过滤器(PTFE) 单膜，13 mm，0.45 μm 200 个/包 AS081345
微孔滤膜 50 mm，0.45μm 200 片/盒 AM021345
一次性注射器 2 mL 无针头 100 支/包 LZSQ-2ML
甲醇 4 L/瓶，色谱纯 4×4 L/箱 AH230-4
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