摘要:本实验采用高效液相色谱 (HPLC)结合紫外检测器,并选择 Venusil○R XBP C18(L) (5 µm,150
Å,4.6 × 250 mm)色谱柱对皂苷提取物中的有关物质进行了测定。结果表明:在波长为 206 nm,流
动相为 0.1%磷酸水溶液-乙腈 梯度洗脱时,测得的分离度较好。
关键词:高效液相色谱法;紫外检测器;皂苷; Venusil○R XBP C18(L)色谱柱
前言
参照客户提供相关方法,对某皂苷样品中有关物质进行分离,建立最佳高效液相色
谱法。
实验部分
仪器、试剂与材料
试剂材料
乙腈为色谱纯;水为屈臣氏水;磷酸为分析纯;
稀释剂:乙腈︰水 = 50︰50(v/v);
高效液相色谱柱:Venusil○R XBP C18(L);5 µm,150 Å,4.6 × 250 mm。
样品制备
供试品:称取皂苷提取物适量,加稀释剂溶解并稀释制成每 1.0 mL 中含 0.5 mg 的
溶液,滤过,取续滤液作为供试品溶液。
色谱条件
色谱柱:Venusil○R XBP C18(L);5 µm,150 Å,4.6 × 250 mm;
流动相A:水(含0.1%磷酸);
流动相B:乙腈;
流 速:1.0 mL/min;
柱 温:30℃;
进样量:20 µL;
波 长:206 nm;
表1.梯度条件
结果与讨论
本实验采用 Venusil○R XBP C18(L)色谱柱对皂苷提取物中有关物质进行了测定。由
图 1、2、3、4 可知,Venusil XBP C18(L)色谱柱对皂苷提取物中有关物质分离效果较好,
能够满足要求。
图 1.皂 苷提取物(95%醇提)供试品溶液高效液相色谱图(下图为上图的纵坐标局部放大)
图3. 皂苷提取物(样品 2)供试品溶液 HPLC 色谱图(下图为上图的纵坐标局部放大)
结论
本实验用 Venusil○R XBP C18(L)色谱柱对皂苷提取物中有关物质进行了测定,分
离效果良好,且保留时间稳定,峰形良好,说明 Venusil○R XBP C18(L)可以用于皂苷
提取物中有关物质的测定。
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