摘要:本实验采用固相萃取结合高效液相色谱的方法,建立了方便面中8种抗氧化剂(PG、TBHQ、NDGA、BHA、Ionox-100、OG、BHT、DG)的检测方法。样品经乙腈提取,Cleanert S C18-N固相萃取柱净化,Venusil XBP C18(L)色谱柱(4.6 × 250 mm,5 μm,150 Å)分离,0.5%甲酸水溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱,外标法进行定量。结果表明,8种抗氧化剂添加量分别为PG: 129 mg/kg、TBHQ: 121 mg/kg、NDGA: 119 mg/kg、BHA: 240 mg/kg、Ionox-100: 181 mg/kg、OG: 117 mg/kg、BHT: 155 mg/kg、DG: 147 mg/kg时,回收率在80% ~ 100%之间,能够满足检测要求。
关键词:抗氧化剂;Venusil XBP C18(L)色谱柱;Cleanert S C18-N
食品抗氧化剂是能阻止或延缓食品氧化变质、提高食品稳定性和延长贮存期的食品添加剂。氧化反应不仅会使食品中的油脂变质,而且还会使食品退色、变色和破坏维生素等,从而降低食品的感官质量和营养价值,甚至产生有害物质,引起食物中毒。
由于合成抗氧化剂化学性质稳定,价格比较优惠且有较好的效果,在预防脂质氧化的方法中,往往被优先考虑,一般使用的合成抗氧化剂有BHA、BHT、TBHQ等。
然而由于这些抗氧化剂不是食品成分之一,而且在食品工业中存在很多违规操作,抗氧化剂的添加往往超出规定的标准,越来越多的研究表明:人工合成的抗氧化剂有一定的毒副作用,有害人们的身心健康,因此对食品中合成抗氧化剂的测定显得尤为重要。本实验建立了高效液相色谱法检测食品中8种抗氧化剂的方法。
乙腈、甲醇为色谱纯;实验用水为超纯水,8种抗氧化剂标准品及化学式,CAS号见表1;
一次性无菌注射器;Nylon针式过滤器(0.22 μm,直径13 mm) ;
Cleanert S C18-N固相萃取柱:2000 mg/12 mL
样品提取 称1 g样品至50 mL离心管中,加10 mL乙腈,震荡2 min,超声10 min,3000 r/min离心5 min,收集上清液至鸡心瓶中,再加10 mL乙腈,震荡2 min,超声1 min,3000 r/min离心5 min合并上清液。
先将小柱用5 mL甲醇,5 mL乙腈活化平衡,然后将待净化液上SPE柱,收集流出液,再用10 mL 乙腈:甲醇=2:1(V/V)进行洗脱,并收集洗脱液,40℃蒸干,用1 mL乙腈溶解残留物,过0.22 μm Nylon针式过滤器后待测。
色谱柱:Venusil XBP C18(L) ,5 μm,150 Å,4.6 × 250 mm
流动相:A: 0.5% 甲酸水溶液;B: 甲醇;流速:1 mL/min
由表3可知,采用固相萃取结合液相色谱法检测食品中8种抗氧化剂,方便面基质加标回收率在80% ~ 100%之间,能够满足检测标准要求。
(标准浓度:PG: 129 μg/mL、TBHQ:121 μg/mL、NDGA: 119 μg/mL、BHA: 240 μg/mL、Ionox-100: 181 μg/mL、OG: 117 μg/mL、BHT: 155 μg/mL、DG:147 μg/mL)
本实验建立了方便面中8种抗氧化剂的检测方法,并结合高效液相色谱对方便面中8种抗氧化剂含量进行测定。对于加标量分别为PG : 129 mg/kg、TBHQ:121 mg/kg、NDGA: 119 mg/kg、BHA: 240 mg/kg、Ionox-100: 181 mg/kg、OG: 117 mg/kg、BHT: 155 mg/kg、DG: 147 mg/kg 的方便面样品,8种抗氧化剂回收率在80% ~ 100%之间,符合实验要求。